MEF细胞形态异样

nichifanlema2

; y) n" x& X( W* p$ ?$ j* U) y6 r. S

7 N, _$ [6 @$ H! R) ]  Z& I7 pT75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：
- G% |) q; P: t( {$ z6 M+ [1.细胞复苏不好；
2 I- l0 G* h" u8 _, r9 n2.传代不均匀。
+ C$ Y6 E& @: Z; t另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

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' x0 q  P% a( G4 H! ~3 I. j& |+ ]7 P
感谢前辈指点，多谢！

runsong

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+ d& `5 p' k1 h8 G
别听他的。
( ^/ h" F: L9 {, q# f5 b其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子% @! s/ [0 p0 J1 E- u3 X

: r  j8 T& n. f- D1 N6 q6 N附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子2 ^% t, }! d+ l9 j& o3 O2 N) `

6 t) |, z, `. n9 F, ^, R+ e2 h% Z消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子* g3 i: i" x3 e7 I

; R$ A# K! e! m7 l% z4 I如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子1 v! E  U/ B3 c5 ]* N( ^
) S+ N: C; M1 t2 g5 y8 `( q4 p
感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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; g$ W6 w* Z( ~- ^8 @' A0 ^图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。