MEF细胞形态异样

nichifanlema2

3 T5 b! q) W0 H/ R$ h5 s- _1 J. H9 S' v
T75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：, i9 V# q3 G0 {# e1 Z) r! N
1.细胞复苏不好；
, k6 E# S5 H; t2.传代不均匀。# M, C5 T$ v! s5 k$ E7 i. c$ ?4 ]
另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子; R: y& u5 c) n. Q
. u# Q3 r8 f# A+ `. v  j0 [: M+ W
感谢前辈指点，多谢！

runsong

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8 D9 M& S" U- D' X! y9 l' G# y) p& ^- i: Z! T+ `
别听他的。5 p& q4 q+ C0 k& q0 @6 `
其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

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. @4 N! x) |1 p# ~( s- u
, `1 d) G. k- Q2 t  q. l附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子) V9 \4 R" t9 {& R; Z! @. r
/ g, L+ A% l6 X1 a4 B
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

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7 T; R+ c% b* [+ E& C* |
6 {7 `3 D& [* _0 _) |) p( R- H如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子" r' T) }( I- o3 k  F: G, ?4 j

* J- K3 `+ H5 C8 V, N感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子. `* E& w! }+ Z4 u$ n$ S
! [) a( d+ l, Q0 _0 K0 s
图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。