|
- 积分
- 154
- 威望
- 154
- 包包
- 215
|
本帖最后由 feifei105 于 2012-7-13 16:22 编辑
$ V2 V% ~+ @) B3 w9 n% @% y( W
! H Z- u0 N# x; |* V# r; q小鼠的BMSC与大鼠，兔子和人的相比很难养，主要就是纯度难提高，我以前分过别的来源的很好分，分出传代后诱导分化证明纯度很高，但用这一套方法来套小鼠的，就不管用。你看到的大多数悬浮的细胞都不是BMSC，而是血类，造血类细胞，不贴壁。以下几个建议，仅供参考：7 t4 X; ]0 z! W3 P2 O1 y
1 小鼠的年龄很重要。不要用中老年鼠，我分的时候用10天左右的。
& V: I6 T l- J2 BMSC在骨髓中含量很少，约占骨髓内单核细胞总数的1/104——1/105，加之小鼠股骨和胫骨都非常小，所以给分离带来很大困难。可以一起多分几只老鼠，但要避免污染。
$ z' F+ c, B, q4 g0 s+ {3 将细胞悬液铺到培养板后，随着培养换液，最初会有少量的细胞贴壁，随着时间的延长，会有单个克隆的出现，这步很重要。
) x# r2 {. d; y! `" n$ m# H3 F _4 挑取克隆到培养孔中，继续培养。
' { |( g) R' b" T# k; X; I9 w5 BMSC有成克隆的能力，但形成的克隆不都是BMSC，所以需要分化鉴定等。3 H2 d c) p* R5 K- u) Q
这样，就可以获得纯度很高的BMSC。还有一点，BMSC好消化，如果传代过程中消化不下来的细胞就不是BMSC，应弃之。 |
-
总评分: 威望 + 20
包包 + 30
查看全部评分
|
发表于 2012-7-10 17:27
发表于 2012-7-10 23:29
