关于人脐带间充质干细胞的几个问题

gan-xi-bao

将MSC加入生理盐水是用于治疗吗？为了防止细胞成团可适当加入人血白蛋白。

王超

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) K2 P+ Z# N' H$ S) S0 g1 Z7 ?
5 ?$ p! _) X& G: u1 [' ~" p3 e这个我不是很清楚，因为原代培养的组织块儿不是我自己亲手取的。我想最好是细胞养好后鉴定一下纯度。

邓子涵

是不是细胞放盐水中时间久了都会破裂啊?  多多长时间为好？  那一位说明一下。谢谢

ditiger

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3 ]* i1 d+ @$ V7 x! A  q
% O! v; n  R0 u6 G消化过头对细胞损伤很大，容易使细胞衰老，并不在贴壁，即使贴壁，也会成团生长。# P; q9 @1 K+ P! Y: b* l* a
半小时后会出现絮状沉淀，因为MSC高表达粘附分子啊，所以细胞浓度大的话，慢慢的细胞就会成团，进而成絮状沉淀，但是容易引起心肺栓塞啊！！！要小心使用啊！！！！！！
% U0 K# N# Y2 o0 T# ^9 i  J' w" [/ M当天的脐带最好6小时内做完。: c& G0 l8 h. |: T7 A' h; t1 _
皿的细胞长不匀，因为培养箱不平。或者最初铺细胞的时候就没有铺均匀！

leostar131

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% K& s* {9 @' B7 F
+ d( A% N- _9 }8 R, P. _我想问一下这位大侠在撕脐带过程中，如果不小心把其中静脉也撕进去了，长出的脐静脉内皮细胞会很多吗？会影响治疗吗

leostar131

回复 肖特 的帖子: M$ a7 ]  \) ~6 n- K0 A! M

4 P& b( r$ e7 x是的，这位大侠说的每条都很准确，对我非常有用，我现在很郁闷的事，现在我把胰酶稀释的比例更大了，终止液也加了很多了，可注入盐水袋中5分钟后还是会有沉淀。我还想问一下，是不是细胞放盐水中时间久了都会破裂啊

leostar131

回复 上帝帮我转运吧 的帖子2 I- l& N$ ~5 U; M$ a
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我在显微镜下看有的细胞已经死掉了，好像DNA都裂解出来了

leostar131

回复 漂泊的风 的帖子# `% \& H, J& Q7 z
0 _/ H/ I+ {3 m/ b1 y' M$ V
有可能也是我们的培养箱有点歪的原因吧，每次总是一边多一边少。还有加胰酶是不是必须要加终止液啊，终止液可以是什么

王超

我比较赞同楼上几位的观点，关于第四个问题我个人的见解是，首先，用胰酶消化得到的细胞不见得都是单个的，有的仍然是数个细胞在一起的小团块，也可能夹杂着组织间质，所以细胞生长时出现聚集现象；其次，细胞各自的状态不一，不排除不同细胞所处生长周期不同的可能。总体来讲，比起组织块培养，用胰酶消化后种植的细胞密度比前者均匀得多。

肖特

1.消化过头对细胞有损伤，损伤的细胞传代后可能会死亡而漂浮在培养基中，通过换液可以除去。
2 X" n; |3 A1 {9 C: ]; u2.絮状物有可能是有死亡裂解的细胞，细胞内的DNA大分子释放出来或形成粘稠絮状，但是具体由什么原因导致有待楼主自己确认。& U+ j( G4 \4 H2 |' Z0 k
3.脐带离体后暂时不处理的话可以置于在生理盐水或者培养基中，4度保存。保存多久还能用，这个不清楚，但是最好24h内处理。
7 z; J  q4 c3 \) z% G6 F4.皿中细胞不均匀，可能因为接种之前细胞没有混匀，或者培养箱放置不平导致皿中培养基分布不均，培养皿放入培养箱中之后注意观察培养液是否一侧多一侧少。