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[请教] 分子克隆:现在问题估计出在了连接上,因为空载体单切自连做转化不成功   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-19 13:02 |显示全部帖子
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7 j5 h$ o% k  c5 o! k
" `$ y; O* n2 @! V7 E6 r- A4 v, x太巧了,我在做一个克隆,情况跟你一模一样啊,载体单酶切自连接,双酶切连接目的片段都没有成功,但是空载体转化长得很好。一直找不到原因,我都想把目的片段P出来连T载体去测序了。无语啊。
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沙发
发表于 2012-7-19 21:57 |显示全部帖子
回复 weiyepan 的帖子
: g# s  f& E* p7 z3 R& }
) _4 J0 ], w% Z4 i" J! G$ q一般载体切完都是跑胶回收的,而且用水溶的。
) ?4 B1 e. a  `4 W1 z; }7 A0 JPCR产物是用高保真酶做的,应该会有磷酸末端吧,具体有没有怎么鉴定啊?
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藤椅
发表于 2012-7-19 21:58 |显示全部帖子
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7 S5 K! ~" p: J3 V
' O3 s8 Z3 ~3 [你造血是做什么方面的呢?我做多能干向造血分化,以后多交流哈。
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