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1.不一样,DC不能算是贴壁细胞,我们只是利用单核细胞的贴壁性质将其(DC的前体细胞)纯化出来,再用GM-CSF 和IL-4诱导单核细胞向未成熟DC转化,在此转化过程中,未成熟DC会逐渐悬浮起来;- F( T& s$ g+ M. z! Z( M
2.单核细胞来源的DC是不可以增值的,一个单核细胞只能转化成一个DC细胞;具体用多大瓶培养要看你拿到的PBMC数量(再细的话还可以考虑里面单核细胞的比例),我们一般按照3x10^6/ml的密度铺瓶,通常情况下,100ml外周血拿到1x10^8的PBMC应该没问题,可以采用T75培养瓶;
5 a. B. E0 D! |3.成熟DC和未成熟DC不能简单按照加了什么因子来决定,目前主要根据细胞表型来判断,未成熟DC低表达CD80, CD86, 以及HLA-DR等,而成熟DC高表达CD80, CD86, 以及HLA-DR等,且表达DC成熟标志CD83,通常用GM-CSF 和IL-4来诱导单核细胞向未成熟DC转化,之后可以用TNF-Alpha来促使未成熟DC向成熟DC转化;
+ K9 i; g1 H# }1 w7 N7 G, X+ X4.没太明白你的意思,但目前临床治疗用的DC普遍都是负载特定肿瘤抗原的DC,这样回输后才可以诱导产生特异性的CTL抗肿瘤反应。 |
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