关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

3 _$ L6 m- I4 C( V! ]+ B. N

# x/ G. d+ \3 a7 @; Q8 J0 v本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：- e6 y4 U8 E* S* r
Dnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal9 V* \0 Q% V# k
We furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。
8 ]4 S' i* H3 m; T/ a' S本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。
( }1 O+ S1 I* K; c9 g问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？- a/ C& \0 ?% N7 \5 C
问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？: n! y) d4 N: C& v2 A8 P
4 A  v7 ^5 Z+ b5 _
这个是文献原文
' n! l+ m6 w3 ^( U  y; o9 o 1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

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囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。
: t; C0 W( I) ?/ k9 j* G第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用

wang66

3 `' \; a$ b( ^6 G0 p) o
2 |% r+ k, O# j' \5 n. K
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？7 r/ ^9 d9 H! x! g" P9 k
% k, S' L# H8 p. L1 }& }2 D
而在本文献中有个结果如下
. a# ]* h' v" n+ E: \* \# YFigure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype.
3 j% Z$ r' u: K4 |9 u8 P

2012-7-25 00:18 上传

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9 G' `$ |: c, d6 V$ i使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？
9 Q% F, N) S9 j+ Z0 d5 w7 {, r# q: b: D1 D7 e
哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~