关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

8 w4 N7 ~' O" I* C: ^
3 ^1 h+ ~$ [- j) G本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：; ~7 [2 H& D& A& W9 e, l  T
Dnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal! k' k# t% B. _/ J! C( J
We furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。
1 K8 f& y% K8 Q* a本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。  N& Z, d) g; J: z& R
问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？
2 x5 F4 d3 l8 h问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？. z" o, C8 a0 C0 r" z
, e" z+ q. i0 a5 f
这个是文献原文( J4 @8 D; s0 R7 G
1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

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wang66

4 o( c" e/ c; z# j
$ S, b. E3 M& d# r
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？/ g" \% i& m) g

3 j. Y# ?8 f! C$ t. Q1 b而在本文献中有个结果如下4 V% r4 S' F* J* \! `, k. K( y
Figure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype.
# m* s7 x, H9 E( }

2012-7-25 00:18 上传

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- M, _% a: s/ e) ?使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？
  o- _: p; {5 c4 t& \
% x* V( Q3 u3 s+ t$ c  D0 Y. @7 ]( A哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~

囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。, P" O% G# A, f  f
第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用