关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

$ \: D8 D& h- M  g) m
% J$ _9 N! s0 c! f5 \1 ~本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：
; b- F( [- a# {+ Y; I' RDnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal
, V+ Y9 C$ a+ ^We furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。
8 Q) v' W6 _# [% V" K/ }本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。; M8 f* _9 `4 X% T) E0 W
问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？
* G, O' t' L+ K- r问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？
" K$ k( ^* l4 ^+ u, m. ]0 {: M3 ]) \. ^+ p8 m+ R$ v
这个是文献原文; T% q0 k4 H6 q# F+ T/ \
1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

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wang66

9 R$ S2 f4 M" c: c( ?% H+ H
4 g8 T: j  B$ n4 y  C% ?0 j
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？
, F: }) |$ J& G4 O; D
7 k  z& l' i0 ^. @$ G3 X4 X而在本文献中有个结果如下
! D/ _9 N- J. Y& u' R" BFigure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype.
0 z- }  p( z! l/ B5 X; o

2012-7-25 00:18 上传

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- ~) Y+ |: E! q1 d使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？
/ ^+ e$ r/ K7 Z# G! l( k5 I2 ?# H9 H0 \( J" x
哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~

囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。
( D. b3 N3 ]# r+ I6 F8 ^第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用