关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

) T: P; c/ @  l& q9 \/ `
* F$ }5 ?+ y" G1 j* k本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：- j4 Z& P- f0 f$ o
Dnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal% t: e: [" K3 x1 @: u% v" {! W
We furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。
1 m- B$ |  l% i本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。8 @. I; R& }2 w/ z, L
问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？5 Q9 k3 P3 Q% V) _; o( g
问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？
. K3 u2 d  l. I6 w" ]2 Z% r0 {' i; |5 n# c
这个是文献原文' M  f1 S$ h4 n4 F: x% |
1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

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wang66

# H4 f7 F# i- r5 c. Y6 o- Y. y* G: ^  Q! ]
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？: y" Y3 [; R3 [* }2 x  m4 g

, b" l$ @" ?& v( ]6 f而在本文献中有个结果如下
1 A: e8 x/ u$ ?  x! Z3 E+ T3 `Figure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype.
5 ]4 c4 {, B5 g3 J2 v  \4 p2 D& x

2012-7-25 00:18 上传

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( h  j$ \! ^4 d: X$ l* s/ U使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？
. Y/ ~. x& h, I, b7 _
" y/ Q: R0 O$ t哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~

囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。
1 A, b' f) N" h# T3 h: z第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用