关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

0 B7 Z4 L7 G4 w: ?
4 x( k; j8 ~8 M/ w& Z+ f$ i
本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：$ ^7 V" t9 u+ z2 O$ x
Dnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal
0 A4 `' K3 E, X7 `' f- RWe furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。2 r1 u$ y8 s% {& q* ~
本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。1 }# [7 @( Q7 }
问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？
2 n+ I* Y0 v2 J5 A. U问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？
; T0 l8 t9 a. J; s: d' m  D
* Z  \; c/ e& x这个是文献原文1 N  w! p0 Q  t3 g  x$ r+ l! i
1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

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wang66

# W6 _' I4 D2 U, [/ U3 }- \; @$ r, p4 U% {
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？2 [& G" O, N6 r+ a$ g& M6 L/ G
0 ^! K+ V: E1 {7 l" m
而在本文献中有个结果如下
0 G9 x& Q6 q4 \; {% fFigure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype., e# Z" k" h* N( }

2012-7-25 00:18 上传

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# x/ i# Z: C% O/ f使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？
* G3 Z8 l% S  f6 O6 n/ p& w7 ]& B- h- ~/ X
哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~

囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。. S- ?; m0 @. G2 v  @
第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用