关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

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% I. r& g* i* y( {2 m+ _本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：
$ M* V6 W( M. n% T1 QDnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal
- J/ P  b" v1 s/ E! pWe furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。
5 D3 h* z' i  C! n- o本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。! k2 g& R3 K" d7 C
问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？
; k  m3 h6 a: B! d4 c' I问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？, D5 Z4 A5 q8 E8 z: D+ ]7 V

8 o8 k" m/ l: M9 J2 f9 z这个是文献原文
5 t; g0 _$ m* r7 B: g 1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

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wang66

" q9 E4 A/ T. Z! ~$ |
$ T; G/ B" P: {  A8 o2 P$ @
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？
( N2 B8 {3 a2 b; T7 G; L% @8 \; N1 T7 N! z# `
而在本文献中有个结果如下
2 C, Z; m* X$ n, {2 C! I8 dFigure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype.
6 `% U, j2 H. m6 Y

2012-7-25 00:18 上传

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使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？
) Y7 u  R5 h% K8 m3 B7 v( U& }+ R& O/ H
哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~

囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。
- I( |8 w* S2 C0 M# C% ?第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用