关于文献阅读的一点疑惑，请教各位

wang66

6 \. {+ e3 T5 n) S7 L4 J

+ n$ M: }8 M' ?! N* ~1 o0 u本人菜鸟，在阅读文献时看到这样一段话不是很懂：; z) N5 A) _# Y8 q! {, w' i
Dnmt1 Is Required for HSC Self-Renewal
; q6 }2 G, R" |( ~- Z4 PWe furtherevaluated Dnmt1△/△HSC functional capacity in a competitive repopulation assay. Whole BM from Mx-Cre-Dnmtlfl/fl or Mx-Cre+Dnmtlfl/fl mice was transplanted at a 1:1 ratio with wild-type(WT ) competitor BM (CD45.1+CD45.2+) into lethally irradiated recipient mice and all mice were treated with plpC at 4 weeks posttransplant。
$ }. s% }( A% N) t  {. f! y本人理解是为了检测Dnmt1基因（-）HSC的功能，分别将WT型的小鼠BM移植到Dnmt1表达（-）和表达（+）的小鼠体内，然后使用plpC4个星期。
5 {7 C) Y4 O/ D0 \' a问题1：plpC我查了应该是 polyinosine-polycytosine 聚肌苷-聚胞嘧啶，应该是干扰素的一种？在这里是起个什么作用呢？
! [, d$ q% u9 j4 P) z' H! ~问题2：在两种纯合子的小鼠体内移植WT型BM，是为了看WT型BM在两种小鼠体内的造血重建么？可是如果要以此确定Dnmt1的缺失是否对造血有影响，为什么不是把两种小鼠的BM移植到WT小鼠体内？5 q9 ~) a- d* A+ S, I
6 b$ d9 U: l, Q+ `: D" j, H
这个是文献原文
1 m) k& M3 L8 k& l/ O- U; D' l 1-s2.0-S1934590909004007-main.pdf (802.38 KB)

2012-7-25 00:07 上传

请用IE浏览器下载
下载积分: 威望 -2 , 包包 -5

wang66

# {( \7 y: ^( ]$ f1 g# a5 P7 y
. y8 b: q- c$ V! \$ n! |
网上查到一句话是：Cre expression was induced in. MxCre;FF1 double transgenic mice by intraperitoneal injection of 300 g polyinosine-polycytosine (pIpC) 3 times every second .大意是使用plpC注射到转基因小鼠体内？激活Cre（重组酶）表达，使得Cre酶切掉dnmt1，跟基因敲除产Dnmt1△/△ mice一个效果么？$ L* U2 n& b3 Z" }/ \

; w. V. E6 ?& ^2 k7 w' s) I* p而在本文献中有个结果如下1 y9 E; a' d& p+ X9 g6 j% |
Figure1D：Differential PB counts in control and Dnmt1△/△ mice before and after plpC. Data expressed as mean士SD; n >_ 3 mice per genotype.7 G& D2 V0 f' c4 K; G

2012-7-25 00:18 上传

下载附件 (54.66 KB)

* ?9 _, q( r5 K2 p: U+ t. |+ b6 L/ T使用plpC后使得PB发生如此改变，但这个又是直接作用在Dnmt1△/△ mice？而不是plpC酶切后得到Dnmt1△/△ mice 那个意思？+ V  j' j2 U* b2 y

& R* T2 S2 R5 @. @哎菜鸟已经完全搞糊涂了，求教各位指点一下，多谢多谢啊~

囡囡

第一问题 PIPC不是干扰素，而是在体内诱导干扰素产生，Mx-1 Cre+性小鼠在干扰素存在下会发挥类似剪刀的作用，将两个flox位点间的Dnmt1敲除掉。
/ T+ p- S* S" F' X/ m/ d* v第二个问题 这个实验是看Dnmt1基因对小鼠造血干细胞功能的影响，同时打入受体鼠的两类细胞，一个是Test细胞基因修饰过的，另一群是野生型BM细胞，主要看基因修饰过的细胞对造血重建的作用