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小弟刚开始做,可能好多写的东西不对,望各位前辈指证。( q1 \ D, X/ A$ E) ]% x, z
首先从分离细胞说起吧,5 Y: P6 S% D( q# }, Z7 x- F
我们实验室主要用F-P 1.077分离骨髓间充质干细胞,主要步骤如下,
' B; J* ~6 n5 |1 T+ d4 I5 U- o. Y/ [1、骨刺5ml病人骨髓液,等比例PBS混匀;2 P6 ?6 L" X0 F6 b( a: t/ ]
2、F-P比稀释后骨髓液1:1或1:2,一定要小心7 p; w5 I0 I% z w+ b0 d8 L
3、800g。20分钟,20度
# J6 J! T& q4 a4 [4、白膜层,稀释3倍体积的F-P体积
* W. ~' D; G' k+ @% V5、300g,10分钟,4度,重复一次
0 N+ K; z+ M6 P! Z0 o$ p6、接种密度5*10的6次方。 |
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