请问大家如何制备的肿瘤细胞裂解物

lxm5668

我们在裂解肿瘤细胞和非肿瘤是用的方法相同。因为细胞裂解关键在于抑制蛋白的降解，细胞破裂后一些蛋白酶会与蛋白相遇，发生蛋白降解，会给实验结果造成误差。采用机械的方法和化学的方法都可以裂解细胞，看细胞量的多少。多的话可采用机械，比如超声破碎法，少的话一般用“细胞裂解液”，所有的方法关键在于要加“蛋白酶抑制剂”！细胞裂解液的配方在“分子克隆”第二第三版上都有，有单去污，双去污、三去污细胞裂解液的不同配方，在此不提供了。

lxm5668

回复 莫邪小仙 的帖子; @! A' N+ v( e* q
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采用液氮反复冻融裂解也可以呀，但是裂解后还是存在蛋白酶遇到蛋白的问题呀，不加蛋白酶抑制剂就会发生蛋白降解。