干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 47233|回复: 5
go

请问大家如何制备的肿瘤细胞裂解物 [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
323 
威望
323  
包包
635  

优秀会员

楼主
发表于 2012-8-14 13:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
在DC研究中,在DC细胞成熟前要进行肿瘤抗原负载,想请问大家是怎么制备的肿瘤细胞株裂解物,就是如何对肿瘤细胞进行裂解的,若有具体步骤更好或者文献,谢谢大家!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
209 
威望
209  
包包
989  

优秀会员

沙发
发表于 2012-8-14 16:45 |只看该作者
匀浆器搓
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
428 
威望
428  
包包
1173  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-8-15 08:02 |只看该作者
我们在裂解肿瘤细胞和非肿瘤是用的方法相同。因为细胞裂解关键在于抑制蛋白的降解,细胞破裂后一些蛋白酶会与蛋白相遇,发生蛋白降解,会给实验结果造成误差。采用机械的方法和化学的方法都可以裂解细胞,看细胞量的多少。多的话可采用机械,比如超声破碎法,少的话一般用“细胞裂解液”,所有的方法关键在于要加“蛋白酶抑制剂”!细胞裂解液的配方在“分子克隆”第二第三版上都有,有单去污,双去污、三去污细胞裂解液的不同配方,在此不提供了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
323 
威望
323  
包包
635  

优秀会员

板凳
发表于 2012-8-15 08:37 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 lxm5668 的帖子5 v* N. ~* N# K+ u7 d) h+ V7 h

& e' a! g4 ~4 L5 R5 i我看有好多人是采用液氮反复冻融裂解,然后进行离心,这种方法会造成蛋白的讲解吗?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
428 
威望
428  
包包
1173  

金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2012-8-15 08:41 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子
, D% [  T. n: f5 R7 N2 {4 f$ n8 ~9 H& q! d% y6 B
采用液氮反复冻融裂解也可以呀,但是裂解后还是存在蛋白酶遇到蛋白的问题呀,不加蛋白酶抑制剂就会发生蛋白降解。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
323 
威望
323  
包包
635  

优秀会员

地板
发表于 2012-8-15 08:44 |只看该作者
回复 lxm5668 的帖子
, {; M, B, j( v* k, M1 e* A1 P- b7 I$ t! b# u
那蛋白抑制剂要在冻融之后加还是冻融之前加?请问你们具体是怎么做的,能方便透露吗?要是方便的话加我球球聊把,给指导下283509942
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-7 12:56

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.