做脐带MSC时脐带粘丝状，什么原因？

huajie881026

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做了几次脐带原代MSC的分离，今天第一次碰到这种脐带：脐带拿回来3小时开始操作，脐带很粘，即使PBS反复冲洗三次还是很粘，有丝状物。3 L' H. u% y: p$ d# O4 F
以前几次脐带都是有点脆脆的，刀划下去很有感觉，这次的却很粘，各位大侠有碰到过这种问题吗？这位产妇有妊娠糖尿病、胎儿出生前因胎窘剖宫产，会是这方面原因吗？
( G1 d& n& T. ^$ H/ R; W6 o, b. Y这样的脐带对分离出MSC有影响吗？( h' O; y8 R8 H, _) |* o) j9 z  N

单个核细胞

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) F3 t$ W- [& V0 n这种情况正常，不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s，会有很大改善。
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另，从照片看楼主的实验物料还需清理干净，注意无菌操作。

蓝O海

从图上看这跟脐带水肿很厉害，这就是脐带粘的主要原因，但是对分离后培养没有太大的影响，估计原代细胞会碎片多一些。多换几次也就行了。: I" t0 F: C# Q& X8 e6 O

蓝O海

的确你的实验环境有很大的污染可能性。注意无菌操作啊。

Roden

脐带水肿，细胞爬出受阻小，反而容易成功。

huajie881026

单个核细胞 发表于 2012-8-15 09:22 * V  O5 z- a& L% G3 n
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' `7 ?/ Y# {# k1 `这种情况正常，不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s，会有很大改善 ...

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谢谢提醒，我们的原代超净台的确比较脏，以后会更加注意！

透明之蓝

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" Y7 \) U7 i5 q8 \+ U5 B+ C. ?3 @6 {  v
+ A( B7 T" v. P6 d呵呵，你要是用过酶消化的方法就知道了，脐带里面很多多糖成分，所以会是这个样子！

huajie881026

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' [$ Y6 N* |3 U+ i) D消化法我的确做过，也的确很粘。不过不用消化法这么粘的还是第一次见& A/ D: q6 t) T0 `/ C
酶消化法我做了一次没成功，所以没再尝试，你用酶消化法细胞量多吗？

PENGMINLBX

脐带粘  很正常的  对分离没什么影响    如果脐带不肿   可能还会比较好      但是你的操作环境很有问题

透明之蓝

回复 huajie881026 的帖子. p8 [& f0 Y& a% L* f5 N
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呵呵，酶消化法，还得加上透明质酸酶，这样就不粘稠了~~
: l, E6 h9 U9 W; E0 B- R你要是着急获取细胞，就酶消化，速度快；要是不着急，就可以用组织块贴壁的方法，一块组织块可以重复利用，收获的细胞更多！