细胞传代

Dongqin11

请教各位，细胞传代时有两种方法，一种是终止消化结束后离心取细胞沉淀，然后加培养基培养；还有一种是直接终止消化结束后补加培养基培养。这两种方法差别就是有其中有没有消化液。如果不离心，对细胞的生长影响大吗？（因为每次离心太麻烦了）

也行天下

回复 Dongqin11 的帖子
0 v: I3 L0 L/ g. E: s+ @2 z! {  Z$ @6 {
我觉得最好还是把消化液去掉，不然肯定会对细胞有影响的。

fenglinzhu

不会影响吧，我个人觉得离心反而会减少细胞数量，甚至伤害细胞。如果考虑到终止消化液的我建议直接刮取啊。

Dongqin11

回复 fenglinzhu 的帖子
' Q% g/ H1 l% i4 {) j8 s& s; W& f' e3 ^0 U; _3 ]) |6 _( l$ v5 ^8 j
请问这句话“如果考虑到终止消化液的我建议直接刮取啊。”是什么意思啊？培养基终止消化后什么刮取啊？

Dongqin11

回复 也行天下 的帖子# `+ }; O0 m) k* g6 I" b
9 J" w4 D0 Q& G: ]
可是，我买的一种细胞的说明书上，就没有说要离心啊，难道是胰酶浓度低的原因？我的是0.05%。

crystal_xjw

影响倒不会很大，因为消化的过程是用胰蛋白酶，但是你的培养基里有FCS，所以FCS会有所损耗，但是对细胞不会构成威胁，只是培养基中的FCS减少了一些，适当多加一些培养基就可以了，或者多些FCS。% x5 C  K, @4 R: s" h

Dongqin11

回复 crystal_xjw 的帖子
2 A" A8 H& s4 j3 l3 s# h+ Q9 A/ C. Y' g. L8 `
哦，受教了~Thank you!

也行天下

回复 Dongqin11 的帖子
4 o* O$ ~1 F3 i: v6 p
" w2 `' T) g* m5 ^" y你养的是什么细胞啊？可能细胞不同，消化传代的方法也不同吧！我养的肝癌细胞和iPS细胞传代都是进行离心或自然沉淀后吸弃上清的。

myboluo

这个要具体情况具体分析，大多常用细胞系或成系的肿瘤细胞系传代时可以不用去除消化液，有些细胞对消化液比较敏感，而低俗的离心反而影响不大，这时候就需要去除（大多见于原代组织分离的细胞）。而有些细胞恰恰相反，离心对其伤害更大，那就要尽量避免离心。
2 ~: ]: M8 j4 H! ~" b8 N, t自己的细胞要想养好（或者为了偷懒），最好前期多分几瓶，不同条件折磨折磨，摸索下细胞的脾气，比如多长时间换液合适，是否有密度依赖（传一瓶特别稀的看它能不能长起来）或接触抑制（细胞长满后不传代，只换液看细胞会不会大面积死亡）

也行天下

回复 myboluo 的帖子1 F' R7 Q3 }4 }, H! a- v% K2 R: q/ k
) ^! p  t& _6 m* X  K) p
学习!