细胞传代

Dongqin11

请教各位，细胞传代时有两种方法，一种是终止消化结束后离心取细胞沉淀，然后加培养基培养；还有一种是直接终止消化结束后补加培养基培养。这两种方法差别就是有其中有没有消化液。如果不离心，对细胞的生长影响大吗？（因为每次离心太麻烦了）

ditiger

我们是先加胰酶，然后倒掉，消化完加培养基。

aulenuyah

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6 g" o7 |  Y  a; q2 e$ {这个要看自己的控制了，首先消化液要少一点，刚好覆盖细胞就可以，然后消化时间比正常略微短一点点，操作时轻柔一点，基本上不会损失很多细胞的

avbn

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) L+ ^8 `. c/ U/ A细胞种类不同，耐受条件不一样，最好做一个分组对照，看看哪种条件细胞活率更高，状态更好

Dongqin11

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在消化即将结束时吸弃消化液，不会损失很多细胞吗？

romanyuo

加胰酶后孵育，趁细胞快要还没被完全消化下来的时候，弃掉大部分胰酶，留下几滴就可以把细胞完全消化下来而且加培养基后残留胰酶很少。

romanyuo

加胰酶后孵育，趁细胞快要还没被完全消化下来的时候，弃掉大部分胰酶，留下几滴就可以把细胞完全消化下来而且加培养基后残留胰酶很少。

bibottll

我都是终止之后离心

aulenuyah

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  A# T$ C- A+ ^$ v/ U6 b/ h6 s* s# e* t
是的，胰酶的量不能过多

shy8610

看情况，我们实验室的规矩是都是离心后重悬的，楼主的这种情况，我个人提个粗陋的看法：很多新人做了一段时间实验后，开始学会偷懒了，总是想这里省一步，那里省一步，其实是不可取的。就事论事的话，可以省还是不可以省，得自己摸索，如果是普通细胞系，当然无所谓，大不了死了重来，但是如果是珍贵细胞系，死了，是不是很多人会选择撒个谎骗老板，总之，不要随便更换步骤，如果你自己确信自己的做法更优秀，我也支持