MEF这状态，大家帮忙看看咋回事啊 - 实验室综合讨论区干细胞之家



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查看: 57169\|回复: 19	go [请教] MEF这状态，大家帮忙看看咋回事啊 [复制链接]

刘森泉

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楼主

发表于 2012-8-21 11:00 |只看该作者 |正序浏览 |打印

MEF刚复苏出来的时候好好的，可是一传代就不好了。于是我用刚复苏出来的MEF转病毒，最后还是状态不好，很多细胞都成碎片了，还在的细胞也都是颗粒组成的。

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20楼

发表于 2012-9-13 11:40 |只看该作者

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加过胰酶后十字交叉轻轻晃匀，放入培养箱温度比室温高，那样消化快一点也不用花太长时间减小细胞损伤几率

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wbj1983

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优秀会员小小研究员

19楼

发表于 2012-9-13 11:08 |只看该作者

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) d9 a9 O( t+ L) T. e
依图来看，应该是支原体污染，培养细胞的过程中防止支原体污染很重要，一旦污染只能重新做，所以大家一定注意，所有过程一定规范。

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baibai

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18楼

发表于 2012-9-12 11:05 |只看该作者

我们也遇到过MEF这样，不是污染了，主要是传代的时候传得太稀了！细胞是密度依赖性生长，这么稀的话，细胞状态就会很容易变差，长成你现在这个样子，而且看起来还脏脏的~~~

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baibai

新手上路

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17楼

发表于 2012-9-12 11:05 |只看该作者

我们也遇到过MEF这样，不是污染了，主要是传代的时候传得太稀了！细胞是密度依赖性生长，这么稀的话，细胞状态就会很容易变差，长成你现在这个样子，而且看起来还脏脏的~~~

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刘森泉

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16楼

发表于 2012-9-8 08:16 |只看该作者

谢谢大家提的意见，非常感谢！

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safflower

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15楼

发表于 2012-9-7 13:51 |只看该作者

你的这种细胞状态我也遇见过，可能是两个问题：1 f- S7 l% @& v- x, [6 M, {$ n
1.细胞消化时间过长，吹打过猛。解决办法：缩短消化时间，一般镜下看到细胞回缩，间隙变大即可终止消化，不要等到细胞飘起，那时已经晚了。吹打时尽量轻柔，不要产生气泡。
2.如果排除了上述问题，细胞状态仍旧像图片那样，就要考虑支原体污染的问题了，支原体污染一般很难除去。有一种除支原体污染的药物，名字我忘记了，一般试剂公司有卖的，有点小贵。