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- 积分
- 9
- 威望
- 9
- 包包
- 94
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1、标本是乳腺癌组织白片: Z1 ^! N, {1 \
, E# [1 |+ y2 U4 K
2、60℃考2小时。
5 M& e! F! r Y: C8 N3 N* L3、二甲苯三缸Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、脱蜡，各10分钟。2 c1 B/ L' i7 }5 i
4、无水乙醇两缸，各 2分钟；6 R# K; @+ S0 n) F; d4 U
5、95%酒精二缸，各 2分钟；$ L& g0 X" d* R5 x: n7 U* w
6、自来水流水冲洗2分钟；- }" c$ Q0 @/ A
7、PBS冲洗2分钟；6 z3 O) ^& F0 p. Z
8、将已冲洗干净组织放入高压锅内，加入约2000ml左右柠檬酸盐的抗原修复液（pH6.0）盖好高压盖检查安全筏，沸腾喷气1.5分钟。
* Y) ]/ M2 c# k4 C9、自然冷却移至蒸馏水中浸泡2分钟。. b9 ?. _: l) N. L9 @' E& u
10、3%H2O2中浸泡10分钟，蒸馏水冲洗3min×3次。
4 J# A/ n/ d9 S4 ?4 r11、取出切片，擦干组织周围的水，用免疫组化油笔画圈笔在组织块周围画一圆圈，9 v. t* Y( H) N( G* V9 T
12、PBS缓冲液冲洗。
9 H2 Y& {! W7 t13、加一抗(CD133)孵育（PBS配制，1：100），将切片放入孵育湿盒中，4℃的恒冰箱中过夜。' U8 Y6 M! c2 {; g0 m
14、用PBS洗3次，每次3分钟。
U3 S! Y9 R! _- m! B15、加二抗在组织上、放入37℃恒温箱中孵育30分钟。（兔/鼠通用二抗）/ c1 l) T, Q4 |# c. j L) w4 {' u
16、用PBS洗3次，每次3分钟。( @$ D! _$ P, Y; m, Z9 b% d
17、DAB显色。
8 V5 ~6 J$ F! S u& V( @18、苏木素染液复染10分钟，
* H+ M7 I" e4 t& S! ~2 ~( Z% q9 O19、1%盐酸酒精分化3秒钟。
D {& f7 K; g" ~ n( ~/ b% ?; t4 {1 N20、流水冲洗5-10分钟。
+ J+ E9 p* z' w9 N21、95%酒精二缸，各 2分钟 无水乙醇两缸，各 2分钟；7 ~3 l1 Y9 G2 J4 {2 q; Y. m
22、二甲苯I、II、Ⅲ，各2分钟23、中性树胶封片% j/ q9 Z7 N+ X3 ] e; v% q4 @ V
结果：我自己觉得CD133是细胞核阳性。不知道是什么原因，帮我在分析一下
9 v, o8 j: R W; b6 E这是厂家第二次给我的抗体，第一是细胞核我以为是抗体原因。
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发表于 2012-8-30 15:18
发表于 2012-9-3 19:32
