怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

aulenuyah

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2 a9 k1 s. B1 z  v9 W什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

aulenuyah

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我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

aulenuyah

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如果这样的话，试试看不离心

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子- q) B- l! d% n! p. y" W* B5 G

/ P. `0 H) g4 G. d2 ?' X/ K怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。

aulenuyah

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$ j7 z5 D. }/ z; X* j效果也不行吗？0 d/ U0 M3 q" Q# g2 O2 K7 M9 `
用的什么浓度的？其实最好用的好像是透明质酸酶，专门消化颗粒细胞的

aulenuyah

回复 hcluo 的帖子6 P' g4 m8 N" G* c  C& e
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楼主要用的是0-3天的小鼠，那么小的小鼠不会有什么有腔卵泡的发育，所以根本没有卵丘细胞的。不然的话，先超排，然后刺破还是会挺多的

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子( u( l+ Q$ R! ~
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所以个人觉得如果需要颗粒细胞，只能通过获得原始卵泡或者腔前卵泡的方式获得。这种方法我试验过，获得腔前卵泡之后，在培养液微滴中培养，之后成功迁出颗粒细胞了