怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

chenchunlei

贴壁？最好能有实验操作步骤

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

chenchunlei

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- ^5 c$ d6 S4 w8 a4 V, Z2 B4 H- U+ j% \0 Z8 h' u* J
要颗粒细胞

aulenuyah

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/ d! ?' t: q# y# o. c% U# o' W什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

chenchunlei

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  Q% d$ p: D4 O* T, y) I  V8 @( T% y$ }2 v
就是将0-3d卵巢消化后怎样获得颗粒细胞
2 Q4 `& ~3 ?: \; O

aulenuyah

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$ o4 l) P" k0 p' `" z( H; U
2 T4 r8 x, G& r* j我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

chenchunlei

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* b! X  B  z! v  S+ j+ ]2 D
" G  A; I# g$ t谢谢( u- P  ]5 r- H/ U# s( X6 _
之前用了四个卵巢一消化离心后几乎没有颗粒细胞了

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子. a' Z4 T, `/ ?% U; v. U* }

. q! J$ G4 @1 A7 W如果这样的话，试试看不离心

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子0 E8 k$ o7 {$ C% M6 i  i; ?
+ x7 r' `! h2 n# u/ R9 c
那岂不会有TE在培养液里- p- K+ w+ d0 X. b: `) G) f( v# g

aulenuyah

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. {! ~. ?: k5 U4 X7 o- C, P" ~5 }6 q. }5 t
怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。