怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

chenchunlei

贴壁？最好能有实验操作步骤

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

chenchunlei

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, i" Q9 g) W+ c; m( m" z" N
6 K. n$ V* x+ c4 b. W! s要颗粒细胞

aulenuyah

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/ m9 l! e1 W5 w3 k) J$ x什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

chenchunlei

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+ f  D, [* {: \; w' Z# S, Z6 U' Q* w# d# J
就是将0-3d卵巢消化后怎样获得颗粒细胞6 h7 V0 c0 X# C8 R# K% m# N

aulenuyah

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. G  _  |4 M+ \  E, W
: [: S6 u/ _7 f# ]* [4 w我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

chenchunlei

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& Y& e. Y1 @" M! e3 C  ~' a' ~) a% H7 _, x+ P' v
谢谢
6 Y0 D9 ^* j) b之前用了四个卵巢一消化离心后几乎没有颗粒细胞了

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子% P/ s) P9 I9 X4 F  `! p
$ \* }" @- }3 O3 [4 |; U
如果这样的话，试试看不离心

chenchunlei

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! H" F0 o$ p: O: c3 L2 Q+ l6 Q8 |
2 {( n+ L8 p* n* a那岂不会有TE在培养液里9 B9 L" K6 Z+ b  X  {/ Q

aulenuyah

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+ `, I( N2 p0 P) w
) ]- Z' E# p1 j  O怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。