怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

chenchunlei

贴壁？最好能有实验操作步骤

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

chenchunlei

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7 b) o* A# W0 R5 c4 ~1 T) B3 m: B& x8 x
要颗粒细胞

aulenuyah

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2 X) `8 R2 f6 z9 v/ @
  j; i: ]' h' K, ?& j/ y$ B+ X什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子4 M2 R5 |" z. v' Y0 B

+ N: ]$ L" [- |* D% x/ z1 _0 F就是将0-3d卵巢消化后怎样获得颗粒细胞' v- O6 `1 Q5 t- t+ m! J+ E

aulenuyah

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& t' N+ @  Y1 z  x5 R1 Q( M/ H) j- Y3 j- H7 y
我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

chenchunlei

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$ t; T: r2 t7 v$ [, l# d& Y! D2 N. q5 o3 C, m. m
谢谢
  `' t7 |- ~- O7 K- L0 w6 x  n之前用了四个卵巢一消化离心后几乎没有颗粒细胞了

aulenuyah

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$ M/ @+ k$ W" @' A# i如果这样的话，试试看不离心

chenchunlei

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3 S, L8 A1 F$ O: l) c那岂不会有TE在培养液里
, A$ k- `  p* t, v- ?) Z

aulenuyah

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) Q1 `! `. s" r2 b0 ], F3 I+ q+ d1 {# w, O" h
怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。