怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

hcluo

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( M, H- s) m, e: E2 L. W刺破卵巢后，释放的出来的卵丘细胞，然后用透明质酸酶消化5分钟，吸去卵母细胞，剩下的基本都是颗粒细胞了。

chenchunlei

回复 hcluo 的帖子1 k. f& H- H! G2 L/ c7 z; H' e
% D3 s1 J! i9 V2 l+ e% V
这时候的颗粒细胞和卵母细胞直径差不多吧
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chenchunlei

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( d: U6 M- n/ J4 U
4 G8 B8 V/ ^  m- R3 `/ J$ ~也用过胶原酶啊
6 H7 W! N; T5 d! A& Z

aulenuyah

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/ X# K, K. u! A3 c* Y$ x0 O2 M( p- ?2 I0 h- q/ T0 \
效果也不行吗？
/ T- E) V6 |* q4 S9 m2 Z用的什么浓度的？其实最好用的好像是透明质酸酶，专门消化颗粒细胞的

aulenuyah

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* W$ C, D) Y  I( c/ Y+ H  {/ t8 B  D
2 G  r1 M. Z6 z" u- S0 i楼主要用的是0-3天的小鼠，那么小的小鼠不会有什么有腔卵泡的发育，所以根本没有卵丘细胞的。不然的话，先超排，然后刺破还是会挺多的

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子$ L( w( K5 j9 m' \

9 ?# [: R: i8 j) e谢谢
  `# [& P/ D2 A+ s+ ?) l

chenchunlei

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- o4 N* [+ M  e9 @0 o6 Y
* Z1 q  G$ S* l( Q那时候应该Cysts应该刚解聚完吧，应该都处于原始卵泡阶段。

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子/ L7 e8 h  N  U
6 v9 L1 x1 t; k. g1 l" H, G# c
所以个人觉得如果需要颗粒细胞，只能通过获得原始卵泡或者腔前卵泡的方式获得。这种方法我试验过，获得腔前卵泡之后，在培养液微滴中培养，之后成功迁出颗粒细胞了