求教：请问有人养过山羊脂肪干细胞吗？？

小小的晓晓

  在实验室做了一个月细胞还没有养出来，真是相当的郁闷。现把我的试验步骤列出来，望各位老师指点迷津
7 [8 t8 }6 @) @' ?+ ?" h# _1.收集山羊的脂肪，一般在3g左右，迅速拿回实验室。
% w* Y* c1 i2 \$ ^  f$ m: D1 x4 u2.在超净台中用加双抗的PBS反复清洗脂肪. 这一步只能用37℃的PBS，不然脂肪会迅速变硬无法进行下面的操作。8 }. s8 k5 l5 D# b  v- ?9 k
3.剪碎。用眼科剪剪碎脂肪，剪成乳糜状。
& F' b& S6 K, F4.消化。加入等体积2％一型胶原酶，37度恒温摇床消化1个小时左右，发现无论消化多久山羊脂肪都无法像小鼠脂肪一样形成粘稠状，并且油脂贴管壁很严重。
1 D0 k; T- [6 y% z$ G5.吹打，。山羊脂肪几乎就不能吹打开，脂肪总是附着在枪头上。& a5 s  v8 B. i. ]( p3 i9 K
6.终止消化过筛，过的是80目还有200目的筛。
4 _- b. h# e7 I* S7.离心，2000转，8分钟。
3 z; O& p6 J9 _+ R8 u# q% n, s% V. {8，加含15%胎牛血清的DMEM，吹打，制成细胞悬液。* z& d  C7 v4 P, Z- |7 p& X: l
9.接种。将细胞悬液接种于培养皿。* g: c- K4 u5 L5 d) M& [' u4 F
这个实验做了很多次，但是每次离心后感觉都没有细胞。第二天去观察也没有贴壁细胞。不知道问题在哪里，望各位老师指点。