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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-11 11:08 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子2 B5 L3 }$ r: M. q% v3 ]' u9 \

; {' [( g  Z8 I. P/ p应该不是细胞代次问题。你说第一天贴壁很好,有图片吗?
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藤椅
发表于 2012-9-11 13:36 |只看该作者
无图无真相,最好传几张照片看看哦:)

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-9-11 21:53 |只看该作者
hiPS细胞复苏很不容易,第一天看上去有克隆,其实肯定活性不是很好了,复苏过程中要加ROCK inhibitor,这个很重要!
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报纸
发表于 2012-9-12 07:51 |只看该作者
回复 小禾禾 的帖子& _, \: z0 t  |

% V: v4 m" ~# t" _' W- T, t$ l! \

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地板
发表于 2012-9-12 08:07 |只看该作者
回复 frankieisme 的帖子' u# F( {0 v3 K: ^3 n; R

- ~  M; i# ], A! V4 v0 v% v; w我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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小小研究员

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发表于 2012-9-12 08:13 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子2 a- q8 H7 q1 d9 e, l8 p  A

9 J& y8 a. I! J# j回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb 可以使用qq截图

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发表于 2012-9-12 08:18 |只看该作者
回复 细胞-77 的帖子& c( g. O* h2 h' M1 M% N& J

/ t* g$ o) X* o- E我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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发表于 2012-9-12 08:53 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子) X4 k7 J9 h& j  }; o- J& x
$ G+ l' U+ F% D$ o9 Y

4 N+ i5 q- T# a" a3 H  p# l$ U  b. N* j5 }& L
补充内容 (2012-9-12 08:54):6 \' K% @. P. F* B! r
这是复苏后24h的照片
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发表于 2012-9-12 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
8 M- G- l( Z7 }) P3 w0 t; v# S& q+ n& }, {0 S
谢谢指点!
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