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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-12 07:51 |显示全部帖子
回复 小禾禾 的帖子9 V- @+ H+ P. q  e- F' Z! O) \

( M  i0 z2 W& l1 z9 v4 m; k6 i

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藤椅
发表于 2012-9-12 08:07 |显示全部帖子
回复 frankieisme 的帖子
5 q) Y; n. y: K+ D
+ s; n- U' ]8 m6 I) d" l& p, K我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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板凳
发表于 2012-9-12 08:18 |显示全部帖子
回复 细胞-77 的帖子' y* T- j: X. ~# @" P9 K

1 p9 |2 Z( j  ?+ Z5 O我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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报纸
发表于 2012-9-12 08:53 |显示全部帖子
回复 细胞海洋 的帖子+ K( ], R# U) i4 Y5 l! Q0 ~; _) B# w2 G% n

; B' Y! ?, @/ G  x# D& ]
! C7 p, ?! e- Q* x% D# I% ?2 ]: G2 y, v7 ], i9 q! G  H9 a+ W# Q: J( T
补充内容 (2012-9-12 08:54):
: M! C  S0 {$ Y0 @" r2 z8 u; C' F这是复苏后24h的照片
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地板
发表于 2012-9-12 09:01 |显示全部帖子
回复 细胞海洋 的帖子0 D' I" d2 B7 x6 M8 w( }& k

8 e# k  _. j$ {4 O% u谢谢指点!

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发表于 2012-9-12 10:57 |显示全部帖子
回复 小禾禾 的帖子' H6 O) C( y2 H9 m

1 }1 Z1 I* `$ ]刚复苏时是这样的,传代1-2次基本就都是典型的克隆了。
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发表于 2012-9-12 11:00 |显示全部帖子
回复 细胞-77 的帖子8 r6 t3 v( ^1 t- m3 y2 I

' U( O7 m; x1 g; T冻存是用Acutase消化的,传2代以后分化细胞就很少了。
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发表于 2012-9-12 11:03 |显示全部帖子
回复 也行天下 的帖子2 b$ q+ F5 B( D# ~$ P" R" o

- P  F9 E  w! E. j' W; e4 n$ L& ^& e你们刚复苏的hiPS细胞是什么样的啊?能传张照片吗?

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发表于 2012-9-12 11:05 |显示全部帖子
回复 小禾禾 的帖子8 u' B7 F; a4 P) `2 c- u5 O2 Z' v8 p8 g
  b& A, E" ^8 \5 U8 b
你们刚复苏时的hiPS细胞是什么样的啊?能传张照片吗?
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