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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-11 11:08 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子# {5 L. p# M9 v& G% d; ?/ F& Q

, v! @8 |0 r, ^% p应该不是细胞代次问题。你说第一天贴壁很好,有图片吗?
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藤椅
发表于 2012-9-11 13:36 |只看该作者
无图无真相,最好传几张照片看看哦:)

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-9-11 21:53 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
hiPS细胞复苏很不容易,第一天看上去有克隆,其实肯定活性不是很好了,复苏过程中要加ROCK inhibitor,这个很重要!
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报纸
发表于 2012-9-12 07:51 |只看该作者
回复 小禾禾 的帖子
# }, Q( C5 c+ M. Z2 n0 o- s+ m- M/ Z; B, G

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地板
发表于 2012-9-12 08:07 |只看该作者
回复 frankieisme 的帖子
3 |1 o' s' |' Y% p. j: c* ~& I0 i+ l8 [( D: t- n1 U- w2 @
我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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小小研究员

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发表于 2012-9-12 08:13 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子0 Z, f$ a% G8 M! U; t; v
& _# r! y) b+ g/ W4 G( O
回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb 可以使用qq截图

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发表于 2012-9-12 08:18 |只看该作者
回复 细胞-77 的帖子) G) r( K$ O* ?2 n
! y& s9 u, `/ u& e% E' K
我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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发表于 2012-9-12 08:53 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
! j* D$ O  L. A6 {6 c/ A+ l3 o  E, f& W) f) g& W3 \% _8 `
- }& m7 N, m! ]2 N2 V
! w; E5 ^  O1 @$ n; e' s. R
补充内容 (2012-9-12 08:54):* R) z9 o8 j( H1 ~" L) F
这是复苏后24h的照片
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发表于 2012-9-12 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子  L' h! {' m/ M: }! R! e( @2 s

; s# E+ |9 ^+ d; G" y/ H2 E谢谢指点!
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