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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-11 11:08 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子
- Y% H& p6 J  P
: `$ [1 V; h# x1 s3 W; e; j4 Y应该不是细胞代次问题。你说第一天贴壁很好,有图片吗?
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藤椅
发表于 2012-9-11 13:36 |只看该作者
无图无真相,最好传几张照片看看哦:)

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-9-11 21:53 |只看该作者
hiPS细胞复苏很不容易,第一天看上去有克隆,其实肯定活性不是很好了,复苏过程中要加ROCK inhibitor,这个很重要!
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报纸
发表于 2012-9-12 07:51 |只看该作者
回复 小禾禾 的帖子
! f. k" v( R1 l4 Q  A& S  }! j$ ~3 r( L( b% z. `0 R1 F/ ~6 M8 o

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地板
发表于 2012-9-12 08:07 |只看该作者
回复 frankieisme 的帖子4 ]' X) B$ S3 L

0 }. L- U3 J1 }- p我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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小小研究员

7楼
发表于 2012-9-12 08:13 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子/ B/ P1 A/ u: F: L. _
4 ?$ @% z7 J8 o% J' G3 L
回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb 可以使用qq截图

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8楼
发表于 2012-9-12 08:18 |只看该作者
回复 细胞-77 的帖子9 T5 n: s& I& i* G

6 E- n" M% i+ a6 a- Y我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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9楼
发表于 2012-9-12 08:53 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
5 h. n9 a' S9 Y0 v% _1 l' ^# c9 Z3 K% F( W0 G" ~: f8 h* ]) w

) d  k! D/ |3 z4 X) T
# K& f, x* r1 L& h补充内容 (2012-9-12 08:54):, c  L- P2 S; t
这是复苏后24h的照片
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10楼
发表于 2012-9-12 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
" z8 ^- `# D+ X, r) j' U' n* h" ]; Y. \1 E/ R+ [$ k
谢谢指点!
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