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请问我养的msc细胞为什么中间这么多空泡?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-9-12 01:41 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 fancheng167 于 2012-9-12 02:08 编辑
; {1 T  h+ w: v- U7 W4 _. i7 r/ s( T+ \% p
新手,刚刚把实验室里前辈养的msc拿来复苏,然后传了几代,是来源于24M的小鼠的whole bone marrow,请大家帮忙看看为什么我从P4 传到P11,现在的P11形态不好而且细胞中间很多空泡,其实传到P8的时候形态就开始不好了,想知道是我养的问题,还是复苏的细胞本身的问题?再就是可以明显看到其他的细胞,那些是什么细胞?
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沙发
发表于 2012-9-12 11:12 |显示全部帖子
谢谢大家的回复,我现在有以下疑问:" _; L' i$ c, u) K2 `& O+ i# S
1.我实验室的前辈说他们用状态好的msc可以传40多代都没有问题,所以我现在很疑惑到底msc可以传多少代?什么时候说明细胞老化了?9 ?# r/ P- ?- C8 Y- c8 |2 w$ B- O
2.确实养的时候我也发现传的密度很重要了,一开始我都是1传4,后来有次长的太快了,我就变成了1传8,甚至1传10,现在想知道如何判断传的密度,到底1传几比较合适?
! c1 t9 g. b/ t  K3.不管传几代,中间都看到杂细胞了,很想高人指点一下我,图中的杂细胞到底是何种细胞?如果我再做一遍纯化会有好处吗?
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藤椅
发表于 2012-9-13 01:18 |显示全部帖子
回复 细胞海洋 的帖子1 {0 {* W+ F2 z* \, h
2 N$ {0 k8 K0 a( `
谢谢版主,知道了

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板凳
发表于 2012-9-13 01:22 |显示全部帖子
回复 jennyshizz 的帖子6 b+ k$ _0 e4 H+ `" ~( b
" W5 g0 l9 c$ K- k/ a8 l/ p: _/ O
谢谢回复,我想请问一下你们消化的时间是多少,我是加1ml的trypsin,然后放37度恒温箱里面孵 2-3分钟,另外我想问下如果要终止消化的话,你加medium之前有没有把trypsin 吸干,还是说直接加 medium 终止消化?
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