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[请教] RNA电泳,求解 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-9-15 23:15 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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第一次做体外转录,加帽,没加尾。浓度1300ng/μl
( i1 F% m; g4 g6 F7 G9 S# j然后用1%的普通胶电泳。
: A" q# n1 h& h, e) ?' `+ _' @. x根本木有注意电泳中RNA酶的问题,木有甲醛,啥都木有注意。: M5 C: ^# z9 J7 \' X9 @" t
跑成了这个弥散带
" q! _  Z% K7 _想问:9 \0 ^3 C: p) [2 \5 B# m$ n3 J1 r' a
1、标准的体外转录产物电泳加不加甲醛,是否用5%的胶影响大吗?
* z, g! J. _# I# o9 x0 A 2、我的片段是不是降解了?是电泳过程中的,还是本身就降解了?3 H& F3 P2 I  l* {3 A) v( J3 v% P- h2 J2 w

: j* l- v  Y7 I2 j注:没有RNA marker,DNA marker 也没有,本人根据经验,产物大小若以DNA marker判断大概有1000-1500,我的目的片段应该是2000nt。

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沙发
发表于 2012-9-17 21:17 |显示全部帖子
我将质粒模板酶切线性化之后用的,之后胶回收。
6 J. Y; m7 U! A' j1 G8 @. {+ K" Q盒子用的mMESSAGE mMACHINE Kit,里面有RNA酶抑制剂。5 [9 G& h# C# V
你的意思是我的样品RNA酶污染了吗?
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