干细胞冻存疑问

cjsbaicai

脐带间充质干细胞冻存时，冻存液如何配置

蓝O海

我想dmso复苏后培养几代应该会去掉吧，我们冻存也是8%dmso，20%血清，72%的培养基。我们以前也不加培养基，后来发现加培养基活率会更好。

wf78365421

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! K, _. F9 e1 C1 K: K这要看你冻存液的成分。如果冻存液的成分为临床可以使用的成分（白蛋白+HES+DMSO），而其中DMSO含量很少，就可以复苏后直接使用。
6 v4 o3 P2 g! g+ d* x如果你用生长培养基+DMSO冻存，因为培养基不是临床级别，所以不能直接给人体使用、

wf78365421

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8 i3 b( E0 y1 x' ]( _9 V. z3 y' V
/ U1 A  Y" N' h8 B* g5 j可以冻存状态下运输（干冰或者液氮），然后复苏直接使用。
0 S5 M6 q' Z- p7 i. R2 I% U除去DMSO可以减少副反应。

elvis.yao

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7 R- n: [* i/ W4 ~( W
那为什么目前很多公司生产的细胞都是在实验室洗去DMSO，然后4℃在8小时内运输？如果直接冻存状态运输然后复苏直接使用不是更方便？

elvis.yao

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# E* J6 ~- j4 P4 J$ T4 D5 a: f( U) }  o6 t
感谢您的回答，但是如果冻存液复苏后，盐水稀释直接后直接使用呢？＜10%DMSO毒性很小吧？

wf78365421

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, T" f( ]5 x7 S
洗去DMSO。因为常温下，DMSO对细胞有毒性。

wf78365421

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) l+ t" }5 d  Z! y8 g+ ~6 I( A" H+ T1 r) w9 f
是的。脐血移植都是连DMSO一起回输到人体。只要量不大，就没有问题。

wf78365421

回复 zfgxb 的帖子
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9 ^& u4 j$ D+ b3 F1 o* U2 q你是染色看活率？6 z5 h! R& S! |( l  K
那你有没有重新接种？看脂肪干细胞是否可以重新生长？

凤城收藏

lindanmiaoyao 发表于 2013-5-17 11:38 " F/ L5 P! T5 H  j7 B6 q, g) z
我之前看到一篇文献上说，DMSO除了有毒副作用，还有促进向神经细胞，内皮细胞等分化的作用

/ O* T- ?9 P1 j3 n0 I3 r其实间充质干细胞冻存液中DMSO浓度相对于脐血来说是小巫见大巫，一份脐血通常使用量在4~5mL左右，移植时可以不清洗，直接回输，因为洗完DMSO后细胞成团厉害，即使这样的患者，移植后也很少见副作用报道，因为DMSO可以通过呼吸排出。愚见。