干细胞冻存疑问 - 干细胞临床综合讨论区干细胞之家



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cjsbaicai

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楼主

发表于 2012-9-19 09:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

脐带间充质干细胞冻存时，冻存液如何配置

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沙发

发表于 2012-9-19 09:19 |只看该作者

用血清重悬细胞，逐滴加入8%-10%的DMSO，分装到冻存管，放入梯度降温盒中。

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xiaolizhang87

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藤椅

发表于 2012-9-19 09:20 |只看该作者

回复 cjsbaicai 的帖子) D" A& B7 }' o/ f

90%FBS+10%DMSO，用之前放冰上或4度冰箱冷却至少30min。效果还不错。。

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cjsbaicai

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板凳

发表于 2012-9-19 09:25 |只看该作者

回复 xiaolizhang87 的帖子, k* m; g0 P# [% K8 r/ W
6 @- _- s8 [: Z8 B0 v7 W( g
如果是用于人的疾病治疗的话，冻存液还可以含有DMSO吗

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jihaijie

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报纸

发表于 2012-9-19 10:12 |只看该作者

细胞冻存就是常规操作吧血清+10%DMSO 然后程序降温

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zhujiang007

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地板

发表于 2012-9-19 12:08 |只看该作者

DMSO分很多级别，选择临床级的。而且在复苏换液后将其除去，不会有影响的。

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joesiezhao

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7楼

发表于 2012-9-19 12:33 |只看该作者

现在临床操作已经不去除DMSO了，而是用药来缓解DMSO毒性及带来的伤害。

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FYH

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8楼

发表于 2012-9-23 14:19 |只看该作者

本帖最后由 FYH 于 2012-9-23 14:33 编辑 , K# L6 n& y% M$ u. l% u$ Z' W
" e3 u8 N# A3 C
可以加点ROCK inhibitor,这样干细胞复苏活得多

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firstaider

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9楼

发表于 2012-9-27 22:46 |只看该作者

冻存液首先关键在于冷冻保护剂，一般常用DMSO此类渗透性保护剂，一般是以9份小牛血清或细胞培养液与1份的DMSO混合而成，现配现用或配置后放入普通冰箱冰盒内冷冻保存，使用前于室温水浴融化。关键在于DMSO的终浓度为10％，对于普通细胞来说，小牛血清浓度似乎高点越好，但没有这个必要，用细胞培养液即可。