细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

birdflubirdflu

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" o# \! k2 e; L4 U
0 K& X, q$ T- g* E7 P: Z1 k6 V请注意神经元的progenitors也是表达EGFP的 ，所以你可以使用S100b 染，或者使用definitive astrocyte markers。

dianying

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8 @4 `( e; ~- X9 A) D! Q" V% w/ [/ G  p( Z0 K7 a% S
EGFP 和 GFAP 都是啥子关系？给补补课呗。

shxwang

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, L; G) `6 s" A" x% P+ d: C& s% o$ g2 F1 {5 X, e4 V9 z
谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子: h6 N. C- e; p9 l7 d# ^
* W1 {2 p. R1 n* g1 l* f
打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。
$ ^. ~/ q+ }  I5 P5 c' u神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。
5 z6 @' \" L7 w5 h6 s# oS100b 是标记雪旺细胞的。

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

shxwang

回复 lxm5668 的帖子1 z9 U, Y5 t4 B8 i
, S+ i+ v0 Q4 f
谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

shxwang

回复 如来的观音 的帖子  V9 r6 x  w  G, g2 |6 {
) u, `5 b# A) Z! b- v/ f, s
谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。