细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

birdflubirdflu

回复 shxwang 的帖子+ a% ?9 R& `) Q

4 \) Y! G( o* Y( d3 L, R' u请注意神经元的progenitors也是表达EGFP的 ，所以你可以使用S100b 染，或者使用definitive astrocyte markers。

dianying

回复 birdflubirdflu 的帖子% C8 b8 z" s; T% R

0 O" w2 Z5 N( }! ]+ P9 dEGFP 和 GFAP 都是啥子关系？给补补课呗。

shxwang

回复 birdflubirdflu 的帖子7 Q) y8 V* A% @5 T  C8 M' e

7 G9 r: q* D0 x谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子4 f" D0 T: q$ @" I& z, W
6 F. R0 G' C# s2 x4 b7 x
打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。
& _; J" [9 l/ A5 p: F. T8 b. c神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。
$ N1 a4 l8 l9 oS100b 是标记雪旺细胞的。

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

shxwang

回复 lxm5668 的帖子0 h% M" x4 W. N6 i, ?* i- t

8 q' N' ?; R5 h3 o( ^谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

shxwang

回复 如来的观音 的帖子& E5 c# Y+ [& }

" }. Y" `- r, _# a谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。