细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

birdflubirdflu

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" z" }' v& a! L
  r( X+ A7 A  H9 u- L; T: Y请注意神经元的progenitors也是表达EGFP的 ，所以你可以使用S100b 染，或者使用definitive astrocyte markers。

dianying

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- m' ?) w+ w7 Q. x0 N
1 i. D, v7 s- aEGFP 和 GFAP 都是啥子关系？给补补课呗。

shxwang

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% y" q7 F5 ~6 Q* P- R# o9 G' V; t
$ o4 I* ]. A6 I) b. S" V谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子- z( c0 v) i0 w- T4 A: [" P, a

' R" x2 Y6 d' c2 V$ F* O4 Q打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。
. ?' }5 p2 G+ x+ z% H& I神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。
+ t3 y+ w& V2 r; \  X1 }S100b 是标记雪旺细胞的。

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

shxwang

回复 lxm5668 的帖子3 _8 w% M* L8 @% t# V6 S. q! o

2 |! u0 L/ z6 p9 }( v谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

shxwang

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6 x- q9 N; q8 C" r- v( L4 G
* A  E/ A7 a5 Y. I0 \" W3 s1 h谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。