求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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3 ^6 G; m& r6 s    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。8 ^2 d; E6 H% s1 x% _. J* s- N
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：8 f! A' }; ~2 o) ~* r, J, K/ v+ x
    融合仪：BTX0 }7 o. n8 o' k# C
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲$ w2 a% y9 I9 |+ |) r. y1 w
    融合液成份：甘露醇         0.27mM
. S! x0 B0 W5 d- t) _" f; b                       CaCl2          0.1mM* f( Z$ i1 M* _- V. {5 L6 b3 ]. U; o
                       MgCl2         0.1mM
4 t2 j1 ?$ P& l                       Hepes         0.5mM
6 v5 `' y" P9 L! ]                       PVA            0.01%( g0 O4 U: ?/ v1 b( q# b

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