求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

hlwwd1987

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/ h6 X. u) z. \( {) e' U6 t: s/ l    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。6 v8 f' H& k* `8 R. E$ E
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：
& A2 H: ~, g) M' b/ @2 k    融合仪：BTX
; O: s/ x2 l& g' {    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲9 ~& d) Z* t$ v( y: ~# f# v
    融合液成份：甘露醇         0.27mM
/ y% t6 C8 }1 D                       CaCl2          0.1mM
- D9 i( T4 N6 l$ _                       MgCl2         0.1mM, U4 W8 A6 e* P  Q* Y! _  Q* i
                       Hepes         0.5mM' c7 s/ G0 h" f  y0 q) r$ P% c3 U
                       PVA            0.01%
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