求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。
/ y5 B" i5 ?7 b9 `2 j9 u* R    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：
$ ]: V% j+ U; D- ]- q/ K! c    融合仪：BTX& h  J  A! ^+ q7 c) K- }8 f7 I2 k/ H
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲
) J3 r  v; |4 ]$ b4 ?5 @; T    融合液成份：甘露醇         0.27mM9 j2 M! g! d1 M1 u) M- C( L, e* X
                       CaCl2          0.1mM
, F  s% ~8 v' S. r' G                       MgCl2         0.1mM
% {' I) M% n# ]( v  d! K7 t                       Hepes         0.5mM$ m/ z* j! a& l' u
                       PVA            0.01%
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