求助！玻片细胞贴壁问题！ - 神经干细胞专区干细胞之家



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Tim

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楼主

发表于 2012-10-23 11:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

本帖最后由 Tim 于 2012-10-23 11:48 编辑

我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

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沙发

发表于 2012-10-23 12:33 |只看该作者

本帖最后由 jhu132llh 于 2012-10-23 12:33 编辑 3 |- h& B8 n2 c( Z

接种的问题: h. N7 T4 j. o: l) O1 z$ S4 ~( r
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞' i" |3 R4 ?) C* Z. i3 G
因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

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quge_00

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藤椅

发表于 2012-10-23 13:05 |只看该作者

本帖最后由 quge_00 于 2012-10-23 13:06 编辑
4 v* O, n& d0 U& }6 q
回复 Tim 的帖子

1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；+ }( J. R5 g3 \9 H3 _
2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，( m. n% x; o# A4 T# I
小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间* W, d$ \! N2 _8 o
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

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Tim

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板凳

发表于 2012-10-29 17:39 |只看该作者

回复 quge_00 的帖子

方法极好！非常感谢！

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小渝

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报纸

发表于 2012-10-30 15:37 |只看该作者

回复 Tim 的帖子+ R2 v( w/ p$ }% t/ P7 P( `, t2 o

我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。