求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

  @0 t& X; N' {2 j6 |3 c# @. F! b0 e! [4 ?' b2 }4 J" C
     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

jhu132llh

; u8 A+ H6 l: \
" J- ]1 u! `7 e% o3 ^
接种的问题- P# t. f! ?& O9 R  A( J( l$ f
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞4 z( g6 B, l: F4 J  C  E7 X) p
因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

quge_00

- w0 u4 t- i6 n& v

8 G3 n7 j  P% C' `5 ^/ ]; u回复 Tim 的帖子
& N; X  r! a, p7 ~8 U  F. S( C* d1 F, z& W
1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；
- Y0 z5 B7 F1 p2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；
% I7 s  l; j9 e6 h. h* X* T6 L/ K3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，# s' X7 ?3 o$ ^- A! h
小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间" J9 _6 S  L% Y6 m
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）* k4 ]! a5 I+ p5 }: l
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

Tim

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- r" p2 a$ f6 j6 w: v0 n
" {0 s: [8 E  Y( C8 I- Y  _; o方法极好！非常感谢！

小渝

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+ d6 e4 s2 ?1 u" C9 @2 f/ K' l( f4 w; T& O. B9 P
我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

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6 h0 `8 y+ k; c6 N4 j5 d2 D) ^! `* J5 v# T5 l. t# t: m
这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

回复 Tim 的帖子1 s/ E# ^6 O, f/ z( _6 T

: O* V8 |: l6 ?' G7 Y' N. u不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了