msc消化时，细胞竟然没有变圆

Demon_CN

首先你要确定你是用的胰酶消化的么，
# k! U( K" {5 T, e" S; g其次胰酶的浓度，有效期
/ F3 y3 u8 ?" T* \% t' ?然后你消化前是否用盐水或者pbs冲洗了残余培养基。

caiyu07248

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. g0 F3 _9 g9 s谢谢！到时候实验一下

caiyu07248

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用的是专门的MSC消化液，可能从-20里拿出来有一个多月了吧。我怀疑可能也有这个问题。细胞消化后计数时，用台盼蓝染色，看着应该是活的。

caiyu07248

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消化前用DPBS洗了两遍了，以前也是这么消化的，没有出现这种状况。因是原代培养，应该会有些杂质，血细胞比较多。我得再试一遍消化液，谢谢！！

caiyu07248

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受教！谢谢！

caiyu07248

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, q& f! Y0 p: w, f用得是专门的MSC消化液，以前用都很好，这次不知道是怎么回事？消化前有用Dpbs洗了两遍的

caiyu07248

回复 qilan2012 的帖子+ T, `/ D8 w! S

3 k. L" D8 l6 @5 O% ~4 b- R# Q吹打后，细胞都脱落了，大部分都漂着，有少部分顽固分子还贴着，亮点应该是血细胞

lmh_yixue

我用0.25%胰酶消化细胞有时候消化30Min才下来，最后传的也很好。开始的时候我也像你一样不敢消化时间长，5min后就吹打，基本上是使劲吹下来的，结果传代很不理想。现在我就等到细胞变亮变圆，晃动可下来一些的时候再终止消化，传代效果不错。

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你消化不下来细胞有一下几个原因! L4 ?6 ~' G. f8 o/ z
1 你用的是胰酶消化的吗？胰酶配置多久了？是新配置的吗？浓度多少？2 j" H  G5 |% L. j
2 你的细胞是什么来源的间充质？如果胰酶没问题的话考虑是杂细胞
1 Y0 H: d* p- q+ w$ n3 细胞在消化的时候是否为活细胞？

prophe

从您的细胞图片显示可能受到污染，杂质较多，细胞消化时细胞没有变圆，首先考虑您的消化操作方法问题，如培养基有没有洗干净，再次考虑你的细胞状态，最后考虑你的试剂如胰酶质量问题！