心肌细胞如何消化

我不是小龙虾

我最近在培养小鼠心脏里的细胞，细胞很杂，长得也很快，但是消化不下来，我尝试过用0.05%和0.25的胰酶消化5min，细胞纹丝不动，用胰酶和胶原酶的混合，细胞还是纹丝不动，最后消化了差不多半个小时，消化下来几个细胞，想问一下你们都是用什么消化的？

BDFCM

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成年小鼠吗？
& F$ ~6 d( t; y; z我做过新生小鼠，取出心脏，剪碎，0.1%胰酶+0.1胶原酶B消化10min，反复吹打10次，第一次取出上清弃掉（多数为血细胞）。再次消化10min，反复吹打10次，上清转至有血清培液中止消化，剩余沉淀重复消化1-2次，至沉淀完全溶解或剩余很少的时候即可。3 p1 h3 x8 e- l. m
成年鼠的话，估计也差不多吧，你可以试试

zhanglei1414

心肌细胞可以体外培养可以继续分列吗？据说心肌细胞是分裂的呀

jiguojie87

我见我同学做过，用的是0.25%的胰酶消化，常温5分钟，用培养基中止消化，反复吹打10次左右，离心收集就行。

我不是小龙虾

回复 BDFCM 的帖子1 a- O1 q6 P8 t/ G, t3 @
5 u. ~2 a+ L. G. H" w
我做的也是新生的小鼠，细胞贴壁后，你用的消化液也是这个吗？我是在培养过程中心肌细胞逐渐死亡，剩下一些不知道什么细胞在增殖，我想消化下来，就消化不下来了

我不是小龙虾

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" J. v$ Z6 K% ]" F: t% A% q9 D最后剩下的应该不是心肌细胞，心脏里的杂细胞吧。。。细胞不会跳动

我不是小龙虾

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! t1 e" g8 M+ Y/ @& a  {) M1 w8 K' l" W- J7 ~
我用0.25的胰酶消化过，没有消化下来。。。而且消化了差不多半个小时，细胞不死不起来，但是增殖能力变差了。

jiguojie87

回复 我不是小龙虾 的帖子/ y3 o& D* w  E: K' l
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如果是这种情况的话，我建议你换一批胰酶试一试，有可能你的胰酶的活性不高。

BDFCM

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! U- B  E  @- u( C6 r不可以分裂的，胎鼠或是新生鼠的心肌细胞有一定的增殖能力，但也有限。成年心肌不能增殖。培养的时候观察的细胞增多，大多是成纤维细胞的增殖。

BDFCM

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( ]* w1 f- I% S! ^  G我倒没有遇见培养的时候心肌细胞死的情况。随着培养时间的延长，心肌细胞会逐渐退化，肌丝结构变得模糊。增殖的多数为成纤维细胞。我基本上还是用最开始的消化液，也不是很容易消化。