第一次分MEF，感觉细胞好杂啊

huangcong1988

组织块贴壁没那么紧的，只要晃动一下就脱落了，而且还要用PBS洗的啊，洗完基本就没什么组织块了，然后就是，你这个没标照相倍数，没法判断细胞是否均一，另外一点，这个原代的MEF，你不会就要用于feeder制作吧？肯定要传两代啊，这样细胞会变得纯一点。

huangcong1988

如果担心组织块影响的话，下次滤一下，大概100目就行了，滤完会很干净，没有组织块，还有一点，3个胚胎一个T75瓶太浪费了，大概一个半胚胎一个T75瓶就行了

huangcong1988

回复 jun8013 的帖子4 x8 o6 r. D& h. k
- X$ B4 J4 B* ]& O/ n2 n- p: k
剪躯干干嘛呢？去头脚，内脏就行了，如果鼠小的话，还可以不去四肢，去头跟内脏就行。躯干剪碎的话，剪得越碎越好，剩下的东西再少的话，应该也能一到两个胚胎一个T75瓶，多了太浪费了，原代就冻，每代都冻，传一代冻一半。

huangcong1988

回复 fwj81 的帖子
2 K6 Q6 v, K7 u1 w
9 x: e% G  ^$ e8 ^3 h  u10倍镜下看的么？还是有点杂，感觉。

huangcong1988

回复 fwj81 的帖子
+ f4 {) Y1 f. V+ ^+ Q% _/ j1 \7 s" X0 Z4 Z2 }' G
这是我上次分的

huangcong1988

回复 jun8013 的帖子5 Q- D3 v- d8 O0 w* ?

% X  C7 J$ O/ b你是说消化传代还是说分离细胞的时候？传代的话，5min太长了，消化的话5min就太短了，所以你分的细胞少。浓度都可以的，0.05跟0.25差不多，组织块多就用0.25.少就用0.05，主要是控制用量，还有消化时间，我一般是10ml左右胰酶，20min，一只母鼠