请教克隆的挑取

your1024

请教一下，大家在挑克隆的时候用的是什么来观察要挑取哪些克隆的呢？普通的体式镜么？为什么我用桂光的那种老式体式镜根本就看不到皿里的细胞呢？它那个底部光源是透视过去的，根本就看不清细胞轮廓。大家有什么好的挑克隆的器材和方法能介绍一下么？谢谢！

eley

一般使用套环法和无限稀释法
7 }7 R" W3 V% x  t1 U- a套环法比较简单，可以去网上自己查一下。

yaolinzhang

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, R! z; n$ e  p4 Q: R, o+ V" R. ]* @我是在相差显微镜下挑的

your1024

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) P  l3 @8 b* G* z, H  p% \/ u* O- p7 o' K1 X
那是在什么镜子下进行的呢？

your1024

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$ A% T$ }# s, Q! y) H- B! \" t4 U7 N$ r7 v! o9 T9 l, u9 l, o
是那种小型的可以放进安全柜的相差，还是那种大型的，放在室内的？

eley

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- p0 m* J# x% H% H) Y
* n$ l1 c9 v% K相差显微镜就可以，我们实验室平常是放在细胞房的，可是要挑单克隆的话，我一般放到安全柜里面照一会紫外，然后在安全柜里面使用，这样有点麻烦，可是避免污染。
. w9 {$ X% e3 N- M: C3 l
, \0 X  C8 @3 d  ^* j最近做了一次，觉得阳性率挺高的，所以就直接用无限稀释单克隆方法了，希望对你有帮助。

aulenuyah

我一个同门一般都是用体式显微镜的，调整一下光就可以了

your1024

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" v& E2 Y4 Q1 s+ Y
  g/ v/ O( J" g: }' f9 S5 |8 ?谢谢你的回答，我们实验室那个相差根本就搬不到安全柜里面去，看来还得想别的辙。能请教一下无限稀释是怎样的方法么？我不是从构建开始做的，有些方法了解的不是很清楚。

your1024

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  s4 O5 ?# F  i/ q" j8 [
, ^0 U: O* C" X* c' l! t请问是调哪个光源呢？我那个镜子底部光是透视的，完全看不到细胞轮廓，加了柔光板也没有作用。能详细说明一下么？谢谢！

yaolinzhang

回复 your1024 的帖子+ R5 ]& v. `6 }) w$ w" s$ Y
4 e& h0 [  E# b. M# X/ l
小型的，在生物安全柜里面