细胞系A549成球实验

lijie107

各位高手大侠们，俺最近在摸索做肿瘤干细胞，想用A549富集干细胞，DMEM/F12培养基里添加bFGF，EGF,LIF,B-27，3天一换液，换液时直接吹匀，然后半量换液。在培养时，细胞透亮，有成片贴壁的，有成串的（2-15个左右吧），有结成小球的（一二十个）；可我不知道什么样才算是真正的肿瘤干细胞球，我也不太清楚怎么养，请各位指教，若能提供比较成熟的protocol，不胜感激，

lijie107

帖子快沉了，怎么木有人指教啊？有经验的分享下吧，比如耗材，以及细胞培养时的形态变化，传代时的操作细节，冻存……

linhua188

你可以上传个图片给我看看～～8 Y8 U! }3 |9 I- Z1 K5 u

lijie107

已经养了40天了，这有球吗？

lijie107

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# i7 N& |* J8 d, s4 z( v# [5 O- [$ k1 A5 F
图片已上传，帮我看下，谢了

ditiger

用肿瘤细胞直接分干细胞貌似有点去分化的意思，最好还是直接从肿瘤组织里分

617507911

回复 lijie107 的帖子  V& M6 s% {; B1 W

" R) O" j0 T! e6 _2 O7 Y貌似你的细胞好像是贴壁的，你用了超低吸附孔板

lijie107

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# x- x4 i' O( d0 F8 M! _4 {/ Z回复 617507911 的帖子
5 r- R4 u1 [9 ]) {* Q2 F( A- p% t: q; f$ }, d) F
非常感谢

lijie107

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bbbb

lijie107

回复 617507911 的帖子
4 O3 l& V% I6 z  y. L$ B; ^" y
" L8 w1 `- F1 M( r你好，这个必须要用超低吸附板吗，我确实用的是普通的corning板；请问你做时会出现这种细胞串、细胞团吗？求解答