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[请教] 液氮罐内冻存细胞是否会污染?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-11-27 11:10 |只看该作者 |正序浏览 |打印
各位,请教,之前我们实验室液氮罐冻存的细胞取出后,微生物培养结果,结果有长菌?不知道是不是液氮罐内引起的污染?请高手给分析一下
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发表于 2016-5-13 15:11 |只看该作者
基本不会
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发表于 2016-5-13 14:36 |只看该作者
估计是从液氮中取出来以后污染的概率比较大!
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发表于 2016-5-12 16:31 |只看该作者
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可能是冻存前或者复苏的时候污染的吧,现在的液氮灌都是气相的,相对来说出现污染的几率很低了
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发表于 2016-1-13 09:37 |只看该作者
有一定的可能性,很多微生物在液氮中是没办法杀死的,而现在市面上的冻存管口为了适应温差,热胀冷缩的时候不至于爆管,都是无法密闭的。也有可能是你冻存时细胞就污染了或者是复苏时候某些细节不到位引起污染的吧
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发表于 2015-7-15 19:40 |只看该作者
液氮肯定会渗入冻存管中的,如果会污染,那还怎么冻细胞
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发表于 2015-7-14 11:54 |只看该作者
首先,如果冻存前细胞检测或者培养没有问题,最大的可能是复苏的过程有问题,有一下几点在冻存过程中可以参考:
2 [: O+ P6 l9 t* A5 M1、冻存管的选择:冻存管一般有内旋盖和外旋盖,建议选择外旋盖,应用过程中可以减少污染情况。
2 y7 D$ M: I% z) A* U! L2、在冻存前可用封口膜,可避免解冻时的一些污染,还可以保护你在管壁上的标注不被酒精弄模糊。$ z7 A; v+ g" x$ h2 m
3、解冻时,可以放在一次性薄膜手套里,在37度水浴中,防止解冻过程中,水浴锅里的不干净的水污染。
" v4 P9 _. |( \* v1 |. D5 Q4、解冻后拿进超净台或生物安全柜前,喷究竟消毒冻存管和你的双手。
7 u; V0 [% ~$ I- `% m" y其他操作同往常,应该可以避免一些污染的情况。
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发表于 2015-6-16 10:04 |只看该作者
1、如果冻存前已经检测了微生物实验,就基本上可以排除冻存经污染了
$ w6 G# w3 J# I3 A. t2、你们使用的冻存管质量,看看复苏完后,管子是不是有裂纹,在就是一复苏时尽量不要让冻存管全部浸入到水中,帽子部位尽量在水上表面
. Z) K! C- K, E* V* }# E3、复苏完后,第一遍离心或者取少量的冻存管细胞,做一次菌检、就可以很容易的判定是哪个环节出问题了" `, a6 Z/ ?4 i& r* c$ x: f
个人观点,液氮污染几率几乎为零,你想啊,-190度的温度,有什么细菌可以在不叫保护液的状态下,不被冻死,除了那一绝对绝对的极少数细胞,太少了,假如果真存在,在室温下,那就能生长,估计也悬
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发表于 2015-6-13 15:35 |只看该作者
有可能是你在东存前就已经污染了,也有可能是在液氮罐中由于冻存管未拧紧,导致污染的
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发表于 2015-6-2 17:26 |只看该作者
冻存的时候一般不会污染,但是你做冻存前处理或者复苏的时候是不是污染了
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