求助：CIK细胞培养

immyouyou

我培养人外周血的CIK细胞在第5天1瓶传2瓶扩增后，集落就紧紧地贴在壁上，而且周围有很多梭形或长长的细胞，晃晃培养瓶也很难漂起来，再继续培养下去，往往集落就会越来越少，细胞变得越来越大，感觉很杂乱，请教一下，怎么回事？
! b9 \! n- q- V- z9 X  Q& d- ?是培养基的量多了还是少了？% ^; N& I2 i0 [6 n  G2 k4 @2 L
血清浓度10%，可以吗？
$ ?: L$ b2 s1 b/ hIL-2 1500U/ML  IFN-r  1500U/ML,浓度大了还是小了？8 B. n. Y. g& V* H6 d; E& C. A* y
谢谢！

kyo000

最好是上张图来看下，更好判断……: u) T6 o9 T6 n% m- {) u1 M7 Z
还有用的什么样的培养基，我们之前用的也是10%的血清浓度，后来换了无血清培养基，
) h9 J8 ~8 A2 G, b$ o, ^5 m个人感觉用无血清培养基养的细胞更好点……# R* v9 X2 I9 @8 I" D. G) f$ R
因子浓度好像大了点……/ |3 _! x7 H: ^$ u0 m

花饶然

我也遇到过这种情况，但是极少，那么多份外周血中就遇到过一次这样的情况，我想会不会和病人自身有关，他抽了两次血，两次的细胞都是这样的。开始悬浮细胞就比较少，一般贴着在，到第7天感觉有一部分梭形的细胞了，跟间充干一样形态。后来几乎都没什么悬浮细胞了，都贴壁了。求指教！

hwlightning

1000U

莫邪小仙

因子浓度是高了点，一般的都是用的1000u的。培养了一次外周血的 长的很不好，最后干脆都死掉了，但是没出现楼主的这种情况，只是刚开始长的很快集落也很大，后来一个周后就几乎不长了，慢慢的都死了。。。

stang198651

因子浓度是有点高了，一般1000u，再低点500u也还可以。

immyouyou

我传2张照片，大家看看，个人感觉CIK还未成熟或过成熟，细胞因子的浓度很重要

immyouyou

immyouyou

hwlightning

细胞密度也很重要，不要传的太稀。