请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
/ A; l2 T" O8 B* q0 \& [诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。) d' P! G- M4 W+ p5 p! B, T
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
2 |- V+ f, H1 |8 v  b可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。' N& h" _; I! j; L1 s5 H
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，1 Z  T# t' g: L4 r2 X) o, t# t
之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。8 s* |3 a- l' H( a/ r7 j" [# M
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。/ ?5 ^: D5 g0 G5 x
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

chimo100

我做跟你的方案差不多，第二天加CD3和IL-1a，脐血和外周血都可以做出来。脐血的CD3+CD56+要比外周血要高，而且脐血的CD56+单阳性的也比外周血多

zhenhuale

回复 bloodroses 的帖子
5 `+ o! o/ w6 o% |8 I+ A4 L! h5 o  @+ U9 e+ j
请问楼主用的是国产的那个厂家的培养基啊？比国外进口的好？

yangpan521

培养基 用X-VIVO15和GT-T551效果应该会好于1640吧？

weijunning

回复 gejianyun 的帖子' U( \6 H% H& n- i; V
& K, ?! p; Q5 X! b5 s1 E
之后只用含有IL-2的培养基进行扩增培养，其他因子不用加了。

luyue6453

回复 kiss2346 的帖子+ E8 h$ Y& {: o1 }! m( Z
5 c) E1 J) t& r/ S
请教您，脐血CIK输注需要配血清吗？有相关文献吗？

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子) [3 J2 \7 \8 j$ j% w) _) G
% q5 S) A) H0 s5 Q7 r+ Q3 a+ |+ @
能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看一下呢？想向您学习一下，多谢了~

孙帅帅

我们   最好时候才28%左右~~   你们是怎么培养的啊？

yizuiqiannianga

脐血和外周血的性质不一样，不能用同一种方法来培养，下次你可以试一下脐血用干扰素伽玛，白二，白一，以及CD3.而外周血在培养过程中不要用白一

sunny.yc

回复 gejianyun 的帖子
) z9 M0 V3 u/ W$ Z+ H9 c9 D9 O; Q' o' O; i4 X# o% v# ~, ?. k" }
如果你细胞培养量不大的话，可以添加50ng/ml的CD3单抗，不过成本就会高很多了