请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
- g/ C$ L3 M8 O诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。/ g  g1 `7 g  l; }2 C# W) f
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。' z( z4 ^" ]7 l: x5 R. D$ d+ l. z
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
5 \( I2 c% _2 c1 m' B) L( l第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
8 ]9 \7 |* K3 u. j0 b之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。  f2 q3 c' b0 r/ M+ t' d
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
1 A& j, C% P/ V+ F! s5 B9 b恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

chimo100

我做跟你的方案差不多，第二天加CD3和IL-1a，脐血和外周血都可以做出来。脐血的CD3+CD56+要比外周血要高，而且脐血的CD56+单阳性的也比外周血多

zhenhuale

回复 bloodroses 的帖子# ]/ m8 r; i2 A( _& ~

* L4 Q# F. G+ x9 g: T) U请问楼主用的是国产的那个厂家的培养基啊？比国外进口的好？

yangpan521

培养基 用X-VIVO15和GT-T551效果应该会好于1640吧？

weijunning

回复 gejianyun 的帖子
8 |7 p. v) Y! `8 M( q  H5 u8 d, _9 F- A0 D9 E0 e
之后只用含有IL-2的培养基进行扩增培养，其他因子不用加了。

luyue6453

回复 kiss2346 的帖子
. P9 n5 [, B# _4 }, P- W' [# \4 N* C1 g5 H9 {3 s8 x, e4 ?
请教您，脐血CIK输注需要配血清吗？有相关文献吗？

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子
* q! C2 H" M% ]$ E0 c5 u, B7 T+ R# @& v' s; E
能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看一下呢？想向您学习一下，多谢了~

孙帅帅

我们   最好时候才28%左右~~   你们是怎么培养的啊？

yizuiqiannianga

脐血和外周血的性质不一样，不能用同一种方法来培养，下次你可以试一下脐血用干扰素伽玛，白二，白一，以及CD3.而外周血在培养过程中不要用白一

sunny.yc

回复 gejianyun 的帖子5 J; D! n: v9 h' G+ r1 _

) ^- A! F' r  X: ^/ {5 @0 P2 r. i; h- T# n如果你细胞培养量不大的话，可以添加50ng/ml的CD3单抗，不过成本就会高很多了