分离PBMC时的疑问？

easternliu

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( I8 Z# w$ q" J% G8 ~2 W& W, L1 E2 t& W. K$ t% W% x, w0 {
sorry，不是针对你，我是指“不会的”这三个字，操作问题也是问题，说不定就是楼主遇到的问题哈。对于新手而言，谈常识有点过了。

easternliu

回复 pengxuleo 的帖子9 Z. A7 y2 Q" G. g* @8 g0 J

# ]0 u( x3 l4 ~大侠顺便帮我解决个问题吧http://www.stemcell8.cn/thread-64671-1-1.html

pengxuleo

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! n) g4 O: H2 W" Z7 g' e2 I! x1 }8 c
0 F5 \, P& u9 ]- s9 c8 A  b# A- {好吧，那我以后回答的时候，写详细点。以后多交流啊

天天天雨雨

若觉得有影响，可以先只吸取明显的白膜层放入一个离心管中，然后下层若有较浑浊有细胞可以单独放入另一个离心管中一起离心，! m2 B; M  M# a5 B; B
我们这样做过，有时候下层的淋巴层有不少细胞，有时候很少便弃掉

cheeray

扩大洗涤液体洗涤。。。你可以多用几只离心管。 这样可以多收集细胞。。。

ljl1988115

这种情况可以适当增加一下离心机的转速

spring1221

回复 gengtongyu521 的帖子  M1 M6 M( r  g! B  C

0 D3 W2 n  `. C# N1 i% H% S除了用PBS洗，用盐水或者1640洗可以吗？

wwxx66

不充分混匀肯定离心效果不好，吸白膜层时尽可能将白膜层洗干净，将白膜层吸出后加入到生理盐水或PBS中，离心前上下翻转一下离心管使其充分混匀，然后2000转，8-10min就可以避免细胞的丢失！
8 ~8 b4 b9 }/ j' T9 u你可以将上清液再次倒入新的离心管中再次离心看一下，我就尝试过，混匀充分后，不存在细胞的浪费！

joe_binyang

回复 gengtongyu521 的帖子1 X, ^. i/ \5 v- g

/ ?5 N) ]/ w+ V: }充分混匀稀释液是必须的，分离液是水性的，只要混合充分，一定能溶解扩散，不影响效果

cheeray

如果你怕收集不全。可以收集时多加几个管。