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楼主: 人医
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谁在做CIk细胞培养   [复制链接]

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包包
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11楼
发表于 2013-4-1 15:12 |只看该作者
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第一天INFr 1000u/ml,血清10%,第二天加CD3 50ng/ml,IL-2 1000u/ml
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金话筒 优秀会员 美女研究员 积极份子

10楼
发表于 2013-4-1 14:40 |只看该作者
我以前也出现过这种情况,后来发现尽管用同样的方法,血源不同差别很大,你要找个健康的,年轻的人采血会发现生长很快,如果是病人身体条件差的话他的细胞长的就慢,你换个人再试试
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9楼
发表于 2013-4-1 14:14 |只看该作者
这个问题要看你以前是不是养的挺好,如果以前养的好现在不好的话,一个是考虑污染,支原体和衣原体,另一个是考虑试剂是否过期
' r- N' r: W- G; y4 }9 X如果之前养的就不怎么好就是你培养方式还有因子加入量的问题:可以按六楼所讲来操作,另外如果IL-2用的是国产医用的话,可以加到1000U/ml甚至更高一些也没问题,另外可以考虑用一下添加CD28
( G8 W/ E3 a( F, |2 }+ Y3 t8 M
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8楼
发表于 2013-3-26 18:08 |只看该作者
楼主提问题应该详细描述 一两句话 再高的专家也找不出原因.
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7楼
发表于 2013-3-26 17:39 |只看该作者
你的血液来源是否检查过,可能分离出的单个核细胞太少;试剂是否过期失效,特别是CD3要注意;是否添加足够血清,有时加一点和不加区别很大的。
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地板
发表于 2013-3-4 18:00 |只看该作者
day0 +INFr 1000u/ml,day1 +CD3 25ng/ml+IL-2 500u/ml。day3+等量培养液+5%同血型血清+CD3+IL-2.以此类推
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报纸
发表于 2013-2-28 07:35 |只看该作者
是否有支原体、衣原体污染,因为支原体、衣原体污染镜下是看不见的,另外细胞密度是否合适,太稀长的很慢。
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板凳
发表于 2013-2-26 11:21 |只看该作者
回复 人医 的帖子
' i4 z. c4 }  C- w( N# I3 [6 D* s; i/ y2 L- A: z5 t
你是做CIK科研的?血样来源不同,细胞增殖情况也不同,你的环境有没有给予最适条件,试剂和以前的有没有变化,是不是有过期的,你自己慢慢琢磨排查吧,祝楼主好运
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藤椅
发表于 2013-2-26 11:04 |只看该作者

$ g! W  i  v& F7 Y请试验下次方案:INF-r 500U/ml   IL-2  300U/ml   CD3  10ng/ml   IL-1100U GM-CFS 100ng/ml
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沙发
发表于 2013-2-22 16:09 |只看该作者
是不是你们的因子工作液放久了
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