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[请教] 求助:shRNA的问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-3-12 21:40 |显示全部帖子
这个,只有看人家用过的或是公司的才最保险,自己做那就要筛选,最后自己确定。
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沙发
发表于 2013-3-13 16:15 |显示全部帖子
如果是sigma网站上的就要多试试了,自己筛选。别人文献里找到的序列也要自己验证。实在不行就要买公司的shRNA,当然也要验证。
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藤椅
发表于 2013-3-16 00:10 |显示全部帖子
不好意思,我真的也没帮上你什么,我做shRNA 也很迷惑,即使我的目的基因下调了,会不会他同时脱靶hit到别的基因,后来只能自己通过其他方法验证了。看表型决定
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板凳
发表于 2013-3-18 15:52 |显示全部帖子
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本帖最后由 老十 于 2013-3-18 15:52 编辑
3 I6 u' ^: H2 {% B' F* c
8 k8 f, S, i1 W" oGFP和luciferase作为control就是认为带一段无意义的片段,然后转入细胞,表明我们这个Knockdown 是shRNA上的target片段起作用,而不是ShRNA 插入载体的作用,或是说不是单纯的转入shRNA载体的作用。也使得筛选过程中的control更严格。
8 m, y* ~0 ~) ^! f* o没帮到你什么,自己多看paper吧。加油了,
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