小鼠骨髓间充质干细胞 原代 两种典型的细胞

644414915

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最近养小鼠MSC; [# u, @# A. w5 ?4 {
发现杂小细胞生长特别明显，大细胞扩增越来越慢
* l" ?# j# B" a; @大的成克隆样生长，小的成群生长，两者或者混杂生长。

suning5

有木有上ficoll？小鼠除杂很重要，可以利用贴壁先后排除。MSC贴壁性快，种植6h左右，其他悬浮细胞排除即可。细胞量足够

644414915

根据楼上兄弟的说法，也就是6个小时后马上换液去除杂细胞？

nydfy

继续传代培养，再看看细胞会不会纯。

细胞海洋

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0 H$ M3 A* `, ?1 P5 Y4 ^
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否则他会看不到& Z0 e% y: N5 k: R

细胞海洋

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看3楼

xiaoyurly

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全骨髓贴壁法2d时换全液，洗一次，然后传代时严格控制胰酶消化时间，MSC相对好消化，3min内大都能掉下来，杂细胞贴壁牢固，这样可以弃去一部分杂细胞，待3代时就比较纯

suning5

回复 644414915 的帖子5 m8 G. O3 y7 ~" E5 R
1 H3 N. v( i: M  ~
对了，间具有易贴壁性。

suning5

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# U7 V& r' u7 w# G: L- d' G% U2 y4 c1 `2 U
对了，间具有易贴壁性。

CatchField

看图片细胞不是很纯。MSC的纯化目前根据其贴壁能力不同来实现最为简便。原代48小时候全换液，也可以看贴的细胞多少来决定换液时间。一般能看到几个明显的单克隆就可以换液了，这样细胞一般比较纯。在传代时也要注意，当大部分细胞消化下来了就应立即终止消化。有些贴壁比较牢的可能是其他细胞如：成纤维细胞，骨细胞等。