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楼主: 644414915
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小鼠骨髓间充质干细胞 原代 两种典型的细胞   [复制链接]

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11楼
发表于 2013-3-25 03:32 |只看该作者
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, X2 L+ C4 G$ T7 j5 C' K6 Q- }, S* k  b( ~' Y) _: m
我基本按照你的说法做了,但是细胞增殖很慢了。杂细胞为啥越长越快呢
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12楼
发表于 2013-3-25 13:34 |只看该作者
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. X& }5 c3 I, r" j
5 [- H6 c9 q  M# |  w不知你用的周龄多大的小鼠,年轻一点的长的比较快,我们一般用4-6周龄。小鼠骨髓MSC确实比较难养出,除杂比较困难。有一点一定要注意,铺盘密度要大,传代时也讲究密铺快传,细胞长到80%满即可传代,2-3d一代一般
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13楼
发表于 2013-3-27 04:24 |只看该作者
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2 ?+ p( L' e: t' o9 ~) u( o
9 V) R( P) v+ A, A& R3-4周的啊

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14楼
发表于 2013-3-27 04:26 |只看该作者
我2-3天传一代,密铺快传,到最后,细胞数量并没有扩展多少啊,直到最后细胞不扩展了,趴在那里不动,变得很宽大
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15楼
发表于 2013-3-27 04:27 |只看该作者
原代的时候长的还挺快,形成典型克隆,但是5-7天后就以形状改变为主,变宽大,细胞增殖速度变慢
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16楼
发表于 2013-3-29 15:51 |只看该作者
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& N) |* x! f1 C/ a# W1 E7 C- P) N: p
4 @% E! O3 l: b$ g1 b( v9 l不知你用的什么血清?小鼠骨髓MSC要用比较好的血清来培养,培养基加谷氨酰胺,细胞不扩增应该就是老化了。如果实在不行建议换用脂肪来源的MSC,性能差别不大,而且好养的多。上一张我们培养的C57的BM-MSC P6的照片,2只4-5w的小鼠铺一个10cm盘,48h换全液,5d有克隆,相机很渣凑合看看,传代到6代时细胞生长速度还可以,杂细胞有少许
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17楼
发表于 2013-3-30 08:36 |只看该作者
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8 L0 I1 ?7 G* L( N2 G! E0 y. X: M: V1 |: s( b, L# b
跟我的细胞超像,总觉得我的MSC长得不对,但不知道典型克隆的细胞长啥样?
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18楼
发表于 2013-4-1 14:30 |只看该作者
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5 a: o9 W$ B* L0 }+ |- v* A! s4 N0 x8 u
) @8 Q$ u* C" Y7 I! X我的细胞和您的原代和传代后都很像,传到第二代细胞就不长了,我想找原因是原代时传代太晚还是传代时消化过度,能说说您的细胞的状况吗?非常感谢!
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19楼
发表于 2013-4-3 10:12 |只看该作者
回复 shagu 的帖子
: v) B4 L$ c6 ~4 l" {
- K! t$ `: P- }' N一直没做出来啊,急啊

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20楼
发表于 2013-4-3 10:14 |只看该作者
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* w' W' q" s/ p  |2 O- q6 H+ ~! G4 i* k! B4 C
你这细胞是骨髓来源的吗,长得快吗
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