小鼠骨髓间充质干细胞 原代 两种典型的细胞

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' ]/ ~) n% p+ z6 ~. m, P最近养小鼠MSC; S/ `1 o2 A6 p: L$ V' K
发现杂小细胞生长特别明显，大细胞扩增越来越慢
% x, B  @  t# n& b; x2 m大的成克隆样生长，小的成群生长，两者或者混杂生长。

suning5

有木有上ficoll？小鼠除杂很重要，可以利用贴壁先后排除。MSC贴壁性快，种植6h左右，其他悬浮细胞排除即可。细胞量足够

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根据楼上兄弟的说法，也就是6个小时后马上换液去除杂细胞？

nydfy

继续传代培养，再看看细胞会不会纯。

细胞海洋

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3 U( B/ N: U2 }" K3 |
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) P( d1 Y0 U/ p6 R4 o/ p! w否则他会看不到
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细胞海洋

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看3楼

xiaoyurly

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4 g. J+ H. h2 p9 c- w
' X' k  l/ _7 v  \# S1 C. ~全骨髓贴壁法2d时换全液，洗一次，然后传代时严格控制胰酶消化时间，MSC相对好消化，3min内大都能掉下来，杂细胞贴壁牢固，这样可以弃去一部分杂细胞，待3代时就比较纯

suning5

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6 G+ s/ W% D) N# K+ }+ |; @/ _0 Q% _" T4 y' U  g3 b
对了，间具有易贴壁性。

suning5

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对了，间具有易贴壁性。

CatchField

看图片细胞不是很纯。MSC的纯化目前根据其贴壁能力不同来实现最为简便。原代48小时候全换液，也可以看贴的细胞多少来决定换液时间。一般能看到几个明显的单克隆就可以换液了，这样细胞一般比较纯。在传代时也要注意，当大部分细胞消化下来了就应立即终止消化。有些贴壁比较牢的可能是其他细胞如：成纤维细胞，骨细胞等。