脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

都说脐带好养活，可是那些细胞似乎都是成纤维细胞，分化能力很差。我做的流式细胞检测很好，可是成指成骨分化很差。
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请指教

henryjia

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7 q7 l5 \+ W  J3 o" v多谢指教。

老姜

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成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
( G+ w0 c" D. i" v成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

henryjia

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, J/ f2 r/ {: m. o9 `6 }1 Z; J您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？
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我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。- n( P9 ]: Q5 D% _- |- e, q! p4 r
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细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。
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是否可以请教您的分化配方吗？
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7 ?* x5 [9 {- v" Q请您指教。多谢1 }# N2 `$ ?$ s

老姜

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脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；
: l( X* l# K2 @$ V6 a8 R! |1 T# N成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

老姜

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分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

henryjia

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我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。
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很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

henryjia

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我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

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能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？" p, ?" ]  h4 f0 d" |/ s

! z; @9 @' m" k2 x" i+ `是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？