脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

都说脐带好养活，可是那些细胞似乎都是成纤维细胞，分化能力很差。我做的流式细胞检测很好，可是成指成骨分化很差。
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  b) w! w4 [4 ?. P8 R请指教

henryjia

回复 老姜 的帖子5 g- z0 U$ s; C- r
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多谢指教。

老姜

回复 henryjia 的帖子) o& \7 E3 f& b; N" I

; `& O: F. t7 x/ L: Q2 e& e  i$ T成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
/ p' Z  ?2 K! Q* W成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

henryjia

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回复 老姜 的帖子/ `( w" w1 X& ~
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您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？
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我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。7 Y; C) `( \+ m% f; M' k2 ?
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细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。5 y8 _6 w; D1 ~! N
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是否可以请教您的分化配方吗？
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! W+ \- B4 T% U6 v3 a2 ^8 @  o9 \请您指教。多谢' P2 l7 Z  d7 v5 Y

老姜

回复 henryjia 的帖子, T3 u! [/ B0 R: C" r7 ?

- K7 m; h: O  Z脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；8 U* E% I) _3 b; N- V
成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

老姜

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分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

henryjia

回复 老姜 的帖子% W! b( u* \9 {/ s" Y# K' `4 b6 R
: K% X4 w" I1 l6 s+ r* V7 ~
我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。
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+ |* Z5 h3 R) @很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

henryjia

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- k  }# O& W% O/ z4 c: c/ b1 F' V7 z我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

回复 jack1381818 的帖子
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能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？
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1 L8 t/ {2 @* J. {; s是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？